文档介绍：中山大学
博士学位论文
miRNA在LPS活化天然免疫反应中的表达、调控作用研究
姓名:牛玉娜
申请学位级别:博士
专业:动物学
指导教师:陈瑶生
20100601
贚活化天然免疫反应中的表达、调控作用研究摘要学位申请人:专业:导师:动物学牛玉娜陈瑶生教授过度的炎症反应则导致疾病的发生,甚至死亡。ü邢虮嗦牖騧天然免疫系统的多个环节,包括免疫细胞分化、发育,芴寤虮泶铮内藕抛5迹赴蜃由伞⒎置冢《靖腥尽⒏粗频取T诓≡腥臼保唤鍪侵匾5奶烊幻庖呋罨蟮男藕诺鹘诜肿樱夷芄恢苯硬斡牖应答和维护免疫平衡,控制过度的免疫反应,引导炎症反应向着有利子动物健康方向发展。本研究以小鼠为动物模型,首先腹腔注射菇ㄈ硐低承匝字天然免疫是机体在进化中形成的古老免疫系统,构成机体抵御病原生物入侵的第一道防线。病原入侵后,天然免疫系统识别病原,产生细胞因子,同时激活炎症反应。适当的炎症反应反有利于杀死、清除病原体,促使组织损伤愈合,但疷,在转录后水平上对基因表达进行调控。目前的研究证明,斡清除病原的过程。深入理解蕴烊幻庖叩牡骺刈饔糜兄诘鹘诨迕庖综合症,∈螅踊蜓贚活化天然免疫反应中的表达、调控作用研究
采用腹腔注射姆椒ǎ帐剐∈蟪鱿諷疢⒆础W橹±硌Ъ比较小鼠与对照小鼠脾脏微小表达谱,获得в基因;其次,、靶基因表达的干扰作用,探讨疶藕磐返骺刈饔玫姆肿踊啤结构坏死。与对照相比,小鼠肝、脾、肺、肾中、.和基达量都急剧上升。在碳ず,.。表达变化,结果发现在⑸湫∈笃⒃嘀杏鰉表达量上调。其中应有调节作用的基因H缓蠹觳饬薽匝性基因【、晒菇诙舅厮滦∈骃P汀查结果显示,小鼠肝、脾、肺、肾均可见充血水肿、炎性细胞浸润、组织因表达量在注射后、好、均发生明显改变。基因在脾、,水平在下降后,蠖枷灾,尤其在肺中,ⅰ⒎危琓诟沃斜泶锪坎高,但当碳螅鋗缴仙%。.诟巍⑵ⅰ⒎⑸,在后,—水平下降至检测极限,。在应答碳す讨校湓谡馑母鲎橹斜泶锍氏植煌魇啤刺激后,在肝中表达持续下降,至毕陆党ィ辉谄⑸希蟠锏礁叻澹下降低于对照水平;而在肺中,基因持续上升,,网络使用表达谱芯片比较⑸湫∈蠛投哉招∈蟮钠⒃嗟膍、、蚼畲蟊浠妒直鹞.、.和丁S肧觳馐匝檠分姓馑母鰉水平,发现其变化趋势跟芯片结果一致。
在小鼠类巨噬细胞洲细胞系中,过表达导致、个靶基因。对这些靶基因进行功能聚类分析治,结果显示与藕转导和应答过程直接相关基因有觯∕藕抛5纪坊觯信号转导通路基因个,,钙离子信号转导通路基因个,趋化因子信号转导通路基因个。根据靶基因预水平高于对照细胞。表明旱骺豑也说明对耵姬、.虮泶锏母旱骺刈饔貌皇峭ü,转。用代重组腺病毒复感染细胞,扩大培养,收毒后氯化铯细胞总腞橹げ《菊沸院突盍Α关键词:天然免疫、、、脂多糖、表达谱芯片测与分析,获得甿缡降南嗷プ饔猛迹馕鰉潜在的作用机制。根据这张图,我们推测谟Υ餖刺激中可能起负反馈调节作用。旱骺豑表达,。.、.明显表达下降,而功能缺失时、.、.这验证了前面我们的推测。有趣的是,,同时转录因子活性而实现的。.靶向调节鞍细胞中共转染和携带蛄械娜诤现柿甋,荧光素酶活性比对照下降%。.赴凶H,检测水平和蛋白水平;蛍结果表示在转录后水平靶向调控颉晒菇ā⒋炕俨《窘榈嫉膍前体表达载体。染旌蟪鱿諧,天后龆啵蟛糠窒赴湓餐崖洌锤炊橙诜ㄊ斩梯度离心纯化腺病毒颗粒。用针对病毒基因组的驼攵愿腥静《綡术。贚活化天然免疫反应中的表达、调控作用研究
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学位论文作者签名:锋易协尸学位论文作者签名:拳孑螂暝坑日期原创性声明使用授权声明本人郑重声明:所呈交的学位论文,是本人在导师的指导下,独立进行研究工作所取得的成果。除