文档介绍：广东医学院
硕士学位论文
抗γH2AX抗体逆转K562/A02细胞耐药性的实验研究
姓名:周芬
申请学位级别:硕士
专业:儿科学
指导教师:陆羡
20080501
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抗抗体逆转/赴鸵┬缘氖笛檠芯中文摘要【目的】【方法】多药耐药琈琢鱿赴某鱿质前籽2』菩Ч限的主要原因,因此克服橇俅藏酱饩龅闹匾N侍狻V琢鱿赴鸐的形成机制有很多,鹕诵薷茨芰υ銮渴瞧渲腥鹊阒弧=昀囱芯糠⑾郑于化学、物理等外部因素导致细胞炊狭时,核心组蛋白的凰堪彼岵谢涣姿峄纬蒠焦点,随后招募、榷嘀中薷吹鞍椎剿鹕舜Ψ⒒有薷垂δ埽徊⒂纱送撇极有可能是逆转耐药的靶点。兔抗磷酸化固寰哂刑匾煨赞卓位丝氨酸残基磷酸化的特点;环孢菌素珻橇俅惭芯孔钤绲腗逆转剂之一;/细胞是有典型硇偷娜撕彀籽2∧鸵┫赴辏哂懈適水平、高堑鞍甮表达的特性。本课题应用法、流式细胞术、单细胞凝胶电泳法及反转录一聚合酶链反应技术,以Q粜远哉眨钥筜抗体逆转/赴鸵┬缘淖饔眉捌浠平惺笛檠芯俊抗体对/赴嘁┠鸵┬缘哪孀W饔眉跋喙鼗啤逋馀嘌鳮癒疉细胞,取对数生长期的细胞用于实验研究。抗体处理前后/赴訟敏感性的变化,分析其耐药倍数和逆转倍数。ハ赴旱缬痉ḿ觳饪筜抗体处理前后/赴碊损伤程度的变化。魇较赴跫觳釱赴⒖筜抗体处理前后/赴陌霉素平均荧光强度狿法检测细胞、抗探讨抗法检测抗抗体处理前后/赴膍珼琈.
【结果】【结论】表达水平。魇较赴跫觳釱赴⒖筜抗体处理前后/。抗体能够抑制/赴增殖,并呈浓度依赖性;当抗体浓度小于/时对细胞增殖的影响小,细胞存活率大于%,所以取小于。。的三个剂量/、/和甇/作为逆转实验剂量。,云涞腎拗到档停孀1妒直鹞.、蛔魑Q粜对照榈哪鸵┍妒.,提示抗体能够逆转/赴訟的耐药性,且逆转作用与浓度呈正相关。取最小浓度抗体即/进行下一步逆转机制研究。。飨缘陀贙赴,抗体处理后可明显增加/赴贏以/籥灰度比值进行水平的相对半定量分析,/,抗体处理固蹇梢圆糠帜孀狵疉细胞对哪鸵┬浴固迥孀狵疉细胞耐药性的机制之一:阻止/赴碊损伤后修复,从而增加纳鄙肆Α猤碜哒疉细胞内赴鹠/赴鹠水平./赴驪—表达下降。。
【关键词】固迥孀狵疉细胞耐药性的机制之二:下调的表达,降低细胞猤谋泶锖凸δ埽黾覭疉细胞对化疗药物的敏感性。抗抗体;/赴荒孀D鸵籇双链断裂;;惶蛋白
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把研究背景多药耐药.,是指肿瘤细胞对一种抗肿瘤药物产生耐药的同时,对结构和机制不同的抗肿瘤药物产生交叉耐药性。抗肿瘤药物细胞毒作用的步骤通常为:药物经细胞吸收后,以活性形式作用于细胞内相应靶点,引起细胞损伤,最后导致细胞凋亡。肿瘤细胞对此过程中的任何一个环节都可以产生相应的变化进行自我保护,形成蔒的机制包括:药物外排增加如产生运输蛋白甮龋灰┪镒饔冒械阒屎土康母谋洌缤仄艘旃酶钚越档汀⒑考跎俚龋坏蛲龅骺鼗蚪榈嫉幕埔约癉损伤修复能力增强等。目前已有针对以上耐药机制开发研制的化疗增敏剂应用于临床治疗并取得一定疗效,其中研究较多的是针对介导的缁孢菌素⑽撩啄芄煌ü肟怪琢鲆┪,并且使基因转录下调,从而起到逆转淖用。多药耐药是临床治疗白血病疗效受限的只要原因之一,因此不断探索新的耐药机制及相应增敏剂成为白血病治疗的研究热点。多数学者认为鹕诵薷丛谥琢瞿鸵┲衅鹱胖匾W饔茫喝绻赴嬖贒修复的缺陷或修复系统受到抑制,更多的肿瘤细胞将会被杀死。真核细胞主要通过两种途径修复炊狭眩捶峭茨┒肆屯粗刈琀。近年来的研究发现,核心组蛋白磷酸化参与以上两个修复途径,在此鹕诵薷粗衅鸸丶饔茫并推测其可能是逆转耐药的一个新靶点。是核心组蛋白囊