文档介绍：东北师范大学
硕士学位论文
农杆菌介导的蔗糖合成酶基因转化花生的研究
姓名:闻珊珊
申请学位级别:硕士
专业:植物学
指导教师:刘立侠
20070601
摘要花生是重要的经济作物,利用基因工程技术进行花生品质的改良已经越来越引起人们的重视。本研究将自马铃薯来源的蔗糖合成酶基因序列通过农杆菌介导法转入到花生植株中,来探索外源嚣基因的表达对花生植物体相关糖代谢产物的影响,并探索转化后花生植株的相关生理变化,为选育高可溶性糖含量的船基因转化的花生植株提供基础。以花生成熟种子的子叶纵切段为外植体,经生长至对数期的农杆菌感染后转入芽诱导培养基进行共培养,此间以高浓度的细胞分裂素/生长素配比促进不定芽的分化,平均的芽分化率可达%。继而将生长状况良好的不定芽切下转入茎伸长培养基上,以低浓度的细胞分裂素诱导茎伸长,下一步将健壮的伸长茎转入不含细胞分裂素的生根培养基中进行生根诱导。共获得了株花生再生植株,其中甓杂τ趎基因进行的觳獬恃粜裕;饰.%。。结果表明,就调节糖代谢可逆性反应的催化酶而言,在诸多因素的影响下,并未提升花生植株体内的可溶性总糖含量;就培养过程而言,本实验进一步完善了农杆菌介导的花生子叶再生转化体系。关键词:花生;蔗糖合成酶;农杆菌;转化
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≯⋯嘉驻┘析剁~电话:——邮编:——学位论文作者签名:辨固。日期:壶咝乙么:壁期:边华簆日独创性声明学位论文版权使用授权书本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知,除了文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果,也不包含为获得东北师范大学或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。本学位论文作者完全了解东北师范大学有关保留、使用学位论文的规定,即:东北师范大学有权保留并向国家有关部门或机构送交学位论文的复印件和磁盘,允许论文被查阅和借阅。本人授权东北师范大学可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索,可以采用影印、缩印或其它复制手段保存、汇编学位论文。C艿难宦畚脑诮饷芎笫视帽臼谌ㄊ期:学位论文作者毕业后去向:工作单位:通讯地址:一日
Ⅷ从言引一、的基本特性和结构高等植物光合作用的主要产物,也是韧皮部运输的主要形式。叶片光合作用合灰籙.;崽橇姿岷铣擅催化反应狦—构成的四聚体【卜。】。在植物的生长发育过程中,既可催化蔗糖合成又可催化蔗在植物体内就小分子的糖类物质而言,蔗糖起着非同一般的作用。蔗糖是成的蔗糖,通过韧皮部的装载运输到库端,再卸载进入库细胞,为库的生长提供养分;蔗糖也是许多果实中糖分积累的主要形式,影响着诸多植物果实的品质形成。蔗糖对植物体的生长发育举足轻重,显然,与蔗糖代谢相关的酶在植物体内的定位和活性表达便成了控制蔗糖代谢的关键。其中,蔗糖合成酶是控制蔗糖代谢的关键酶之一。为明确对植物体生长发育和代谢的调控作用,多位学者先后曾对鼯基因进行过不同受体植株的遗传转化,并通过对基因转化植株遗传特性的分析得出了一定的结论。以往的研究工作表明,反义转化植株具有一系列的生理特性:库器官绻中蔗糖积累较多,淀粉含量明显下降,座果率降低等。本研究将马铃薯来源的通过农杆菌介导法转到花生植株中,来探索转化后花生植株的相关生理变化,为选育高可溶性糖含量的花生植株提供基础。植物体内与蔗糖代谢相关的酶主要有三种:崽敲又称转化酶或贿喃果糖苷酶,催化反应籊,蔗糖合成酶呋赡娣从其中,蔗糖合成酶,且恢执嬖谟谙赴手械目扇性酶,也有些不溶的附着在细胞膜上,,但通常认为主要起分解蔗糖的作用【俊4蠖嗍参镏兄辽儆辛街謘的同工酶,它们通常都有较高的氨基酸序列同源性和相似的生化性质。但在基因调控上它们有明显不同,各自的基因表达都有发育和器官特异性【俊腓的大小约为,的长度约为梢欢缘任换蜃槌桑有些植物是由一对非等位基因组成。自马铃薯来源的的氨基酸顺序缦拢
二、基因转化的研究进展克隆到船基因,并已实现对番茄⒑懿贰尽和水科榷嘀种参锏淖;目前,已经在马铃薯‘酗、玉米‘、甜菜】、胡萝】甘蔗‘ǖ燃甘种参镏Ⅱ【荆甐、厂、,、,近几十年来,分子生物学和分子遗传学得到迅猛发展,生物体遗传物质的研究取得了前所未有的进步,人类已经可以在细胞和基因的水平上干预和改造生物的遗传特性,依照人类的意愿设计出新的基因蓝图。自年第一株转基因植物问世以来,各国学者投入了大量精力致力于植物基因工程工作的研究。为了进一步明确对植物体生长发育和代谢的调控作用,多位学者曾对黜进行过遗传转化,并就基因转化植株的