文档介绍：朱卫国教授论文评阅人刘丰教授刘宏广州
救模拟失重对大鼠承重骨骨组织细胞凋亡的影口向硕士研究生:麦燕兴指导教师:黄震摘要研究背景地球上,正常人体的运动系统承受两种刺激:重力欢碳和运动鞫刺激A秸呦嘟岷稀⑾嗷プ饔猛ü幌盗猩怼⑸涛止亲橹慕峁来适应这种力学环境。空间飞行中的最重要环境特征之一就是微重力е。失重是物体只表现为质量而不表现为重量的特殊力学环境一微重力忠鹓环境,是航空航天过程中人类必须面临和克服的问题,已有的研究表明,失重可导致心血管系统、骨骼系统、免疫系统等的生理甚至病理改变。研究认为,上述生理变化的产生是失重通过感觉传入信息变化、体液头向转移和重力负荷力学作用消失三个不同层次的生理效应发生作用。骨质疏松是一种常见的代谢性骨病,以单位体积内骨量减少,骨矿物质沉积减少,而骨的成分含量不变为特点。骨质疏松分为原发性骨质疏松与继发性骨质疏松。失重性骨质疏松属于继发性骨质疏松的一种,是以力学因素为主所致的骨质疏松。失重导致骨骼系统病理生理改变的相关研究表明,长期载人航天飞行中,航天员长时间生活在太空中,会因失重导致航天员出现废用性骨质疏松。失重导致的废用性骨质疏松主要表现为骨量丢失、骨矿盐含量下降、骨密度降低、骨生物力学性能下降,粪钙和尿钙排出量增加,血钙升高,出现负钙平衡。在失重环境,人体所发生的一系列适应性改变中,大部分系统的变化厅乡
有一定自限性,在航天飞行中会达到新的平衡状态,不再继续发展,只有骨系统的变化呈现出进行性的过程,因此,长期的失重环境,骨矿盐的持续丢是航天飞行中人类所面临的严重生理反应之一,也是妨碍人类长期太空停留探索外星球的主要障碍之一。航天医学界非常重视失重条件下骨代谢的研究,然进行了大量的研究工作,但骨丢失的机理仍未阐明,虽已采取了各种防护施,仍不能有效地防止失重环境下负重骨的骨丢失。由于国际空间站的建立、星探测计划的实施,人类在太空中停留的时间将进一步延长,如没有有效的护措施,骨的持续大量丢失,有可能导致高钙血症、肾结石、软组织钙化、理性骨折等病理变化。因此,预防失重状态下骨丢失的研究已成为国内外航医学领域的重点和热点。人体的骨组织由骨祖细胞、骨细胞、成骨细胞、破骨细胞等构成。成骨细、骨细胞是骨组织中最重要的力学感受细胞,目前大量研究已证实,失重和拟失重导致的骨丢失是一个以骨形成抑制起主导作用,并以成骨细胞数量减、骨矿形成障碍和骨成熟延迟为特征的病理生理过程。由于微重力下成骨细、骨细胞等缺乏必要的机械力刺激,使其增殖和分化功能下降,导致成熟成细胞、骨细胞数量减少,骨形成下降,这是造成空间骨丢失的主要原因。目关于失重性骨丢失的研究焦点和热点主要是成骨细胞、骨细胞对微重力的响、信号传导、基因表达和功能变化等。研究目的:建立大鼠尾部悬吊模拟失重模型,研究模拟失重对骨组织中细胞凋亡的影响,并从疐揪渡咸教质е匾鸸亲橹邢赴蛲龅幕啤研究方法:⒛P椭票福周龄雄性大鼠只随机分为及尾吊模拟失重组和相应对照组;尾吊模拟失重组大鼠用透气胶带粘贴于尾部近部两侧,透气胶布远端悬挂于自由滑动的塑料环,使大鼠呈头低位,身体与地面呈。,后肢自由悬空不负重;对照不予处理,于相同笼具等量饮食饲养。⒍愿髂P妥榇笫蠓从Φ墓鄄欤汗鄄煳驳跗诩浯笫蠡疃⒁场⑻逯乇浠摘要
皮毛尾部色泽;建模后、取血清行骨代谢生化指标测量,取右侧胫骨近端制备石蜡切片。⒐谴簧副瓴饬浚豪妹拦虐远治仪分别测血清钙嫉狫、磷最馑岜壬ǚ、碱性磷酸酶趸搅酸二钠比色法8菘乖肟固寰赫越岷系脑恚细癜词褂盟得鞑僮鳎放免法在型放射免疫分析仪上测骨钙素。⒐亲橹幌赴蛲黾觳猓喝∮也嚯止墙酥票甘衅幌赴亡检测技术检测骨组织中细胞凋亡。技术原理是生物素标记的在脱氧核糖核苷酸末端转移酶淖饔孟拢梢粤拥降蛲鱿赴虻蛲鲂√逯杏珊怂崮谇忻盖卸系腄短链的┒巳笨冢⒂肓庸趸或碱性磷酸酶的链霉亲和素特异性结合,后者可催化底物显色,特异准确地定位正在凋亡的细胞,因而在光学显微镜下即可观察凋亡细胞。⒐亲橹疐蛋白含量测定:取右侧胫骨近端制备石蜡切片,免疫组织化学方法检测骨组织中鞍缀俊C庖咦榛怯τ妹庖哐Щ驹硪豢乖固反应,即抗原与抗体特异性结合的原理,通过化学反应使标记抗体的显色剂浮金属离子、荧光素、同位素陨ɡ慈范ㄗ橹赴诳乖多肽和蛋白质其进行定位、定性及定量的研究。统计方法:所有数据采用叉±⒌ハ蚍讲罘治觥⒅馗床饬糠讲罘治黾八蛩胤讲罘治析因分析进行统计分析,多重检验,当方差不齐时选用痵、。研究结果:⒋笫笪驳跚榭觯何驳跗诩浯笫蠡疃⒔澄奘芟蓿薹醋R病⑽膊咳血坏死及感染现象,动物成活,悬吊后两组大鼠体质量基本保持稳定增长硕士学位论文
间延长,模拟失重组骨组织中细胞凋亡指数比模拟失重组有所下降,差异有统计学意义龋,,.模拟失重组较D馐е刈楣亲橹邢赴蛲鲋甘兴陆担钜煊型臣