文档介绍：第一军医大学
博士学位论文
食管癌比较蛋白质组学初步研究
姓名:黄志勇
申请学位级别:博士
专业:胸外科学
指导教师:王武军
20070420
食管癌比较蛋白质组学初步研究博士研究生:黄志勇指导教师:王武军摘要食管癌是我国常见的恶性肿瘤之一,近年来大量统计资料表明,我国的食管癌发病率和死亡率呈逐年升高。早期预测和诊断食管癌是提高食管癌生存率的关键,对改善食管癌预后有重要意义。蛋白质组学研究方法和技术为食管癌发生分子机制及早期诊断和预防的研究提供了有利条件。本研究以正常食管粘膜和食管癌组织为研究对象,采用比较蛋白质组技术鉴定了鲇胧彻馨┓⑸喙氐暮蜓〉鞍祝⑻教至薍和在食管癌发生中的作用及其功能,具体研究结果如下:⑹彻馨┳橹鞍字仕蚰旱缬炯际醯慕⒓捌溆呕优化食管组织的蛋白质样品制备方法,建立食管组织的双向凝胶电泳图谱,为识别鉴定食管癌发生相关蛋白质奠定基础。在此基础上我们初步建立了分辨率较高且重复性好的食管组织蛋白质双向凝胶电泳图谱。⒄J彻苷衬ず褪彻馨┳橹牡鞍字首樗蚰旱缬痉治为了更好的理解食管癌发生机理和寻找食管癌的标志分子,我们运用双向凝胶电泳技术对正常食管粘膜和食管癌组织进行了差异表达双向凝胶电泳分析,数字化图像分析发现有个蛋白质斑点在两组凝胶中有显著差异表达,在食管癌中表达量升高的蛋白质斑点有个,在正常食管中表达量升高的蛋白质斑点有个;定性差异表达分析泶锪肯嗖兑陨发现个蛋白质斑点仅在食管癌中出现,而有个蛋白质斑点只在正常食管粘膜中检测到,结合软件分析和手工筛选,选取龅闱逦冶泶锼礁谋涿飨缘牡鞍字实阕魑V势准博士学位论文
定的靶点。⑺蚰旱缬静钜毂泶锏鞍字实闹势准ê脱橹以正常食管粘膜和食管癌组织为研究对象,采用分离技术结合甌质谱鉴定了鲇胧彻馨┓⑸喙氐牡鞍祝渲惺彻馨┳橹斜泶上调的蛋白质有磷酸丙糖异构酶⒚坛趸锲缁负腿刃菘说鞍状细胞癌抗原⑾赴堑鞍和膜联蛋白谑彻馨┲斜泶锵碌鳌4蠖嗍钜蛋白功能涉及肿瘤细胞生长、运动、凋亡等过程,研究结果为阐明食管癌发生机制及寻找食管癌的潜在标志物提供了理论依据。为保证蛋白质组技术鉴定结果的可靠性,在水平对候选蛋白进行了进一步验证。采用半定量技术对编码候选蛋白的水平检测结果表明:虯谑彻馨┳橹械谋泶锉绕湔W橹泶锏停、虷在食管癌组织中的表达比其正常组织表达高,的结果与蛋白质组学技术的鉴定结果完全一致,说明候选蛋白在食管癌中的蛋白水平变化主要是由于基因的转录水平高低不同所致,也肯定了候选蛋白在正常食管粘膜和食管癌组织中的差异表达。结果表明通过蛋白质组技术筛选到的⑷刃菘说鞍胧彻馨┓⑸南喙匦苑治为更好的理解食管癌发生机理和寻找可能的肿瘤诊断标记分子标志物,我们用蛋白质组学方法对正常食管组织和食管癌组织的差异表达蛋白进行了研究,免疫组织化学进一步验证和分析了热休克蛋白和膜联蛋白鞍自谡J彻组织和食管癌组织中的差异表达和定位。例临床食管癌组织标本的免疫组织化学研究发现热休克蛋白表达和膜联蛋白笔в胧彻馨┓⑸灾喙亍=果表明,食管癌热休克蛋白的表达和和膜联蛋白娜笔в胫琢龇⑸喙兀可能在恶性转型中发挥重要的作用。综上所述,本研究应用比较蛋白质组技术对正常食管粘膜和食管癌组织进行了对比研究,获得了霾钜毂泶锏鞍字什⒍訦和进行了初步验中文摘要肿瘤相关蛋白是可靠的。
证。分析结果证实食管癌热休克蛋白的表达和的缺失与肿瘤细胞的发生相关,在食管癌恶性转型中发挥重要的作用,可能是阻止食管癌发生的关键分子之一,研究结果将为食管癌发生相关研究和药物的筛选提供有用的研究信息和药物分子靶标。关键词食管癌蛋白质组学双向凝胶电泳质谱博士学位论文
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食管癌比较蛋白质组学初步研究前言一、食管癌研究的意义食