文档介绍：分类号
硕士学位论文
题目:华贵栉孔扇贝卵黄蛋白原基因克隆表达及其免疫功能的初步研究
英文题目: Primary Studies on Cloning, Expression and Immune Function of
Vitellogenin Gene in Noble Scallop Chlamys nobilis
姓名张倩学号 10908034
所在学院理学院导师姓名郑怀平
专业海洋生物学
入学日期 2009 年 9 月答辩日期 2012 年 6 月
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作者签名: 日期: 年月日
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日期: 年月日日期: 年月日
汕头大学硕士学位论文
华贵栉孔扇贝卵黄蛋白原基因克隆表达及其免疫功能的初步研究
Primary Studies on Cloning, Expression and Immune Function of
Vitellogenin Gene in Noble Scallop Chlamys nobilis
学位申请人:张倩
导师:郑怀平(教授,博导)
专业:海洋生物学
答辩委员会主席:
答辩委员会委员:
汕头大学海洋生物研究所
中国,汕头,515063
摘要
摘要
华贵栉孔扇贝(Chlamys nobilis)以其贝壳具有橙色、橙紫色、紫色、褐色等多种绚丽的
色彩而闻名。因其营养丰富、味道鲜美、生长快、养殖周期短、经济效益高,自上世纪 70
年代就已经成为我国南方重要的海水养殖贝类。
卵黄蛋白原(Vitellogenin, Vg)作为卵黄蛋白(Yolk protein, Vn)的前体,广泛存在于卵生
非哺乳类性成熟动物中,在卵子和胚胎的发育过程中具有重要的作用,不仅能为发育中的
动物胚胎提供氨基酸、脂肪、碳水化合物等营养物质,还能转运类胡萝卜素、维生素等功
能性物质,此外,还在生物体内参与免疫防御过程,具有免疫功能。
本文以华贵栉孔扇贝橙色和褐色个体为材料,首次克隆了 Vg 基因的全长 cDNA,并
进行了同源性分析、时空表达分析及其与类胡萝卜素含量、总抗氧化能力的关系的研究,
初步分析 Vg 基因免疫相关功能及其作用机理。主要结果如下:
1、Vg 基因全长 cDNA 序列的克隆。采用同源克隆结合 RACE-PCR 的方法,首次克
隆得到华贵栉孔扇 Vg 基因的全长 cDNA 序列,全长 7760 bp,共编码 2289 个氨基酸残基。
取 21 个物种做同源分析发现,栉孔扇贝(Chlamys farreri)和虾夷扇贝(Mizuhopecten
yessoensis)显示出更近的亲缘关系,先汇成一支后与华贵栉孔扇贝汇聚,之后依次与其它
海洋贝类、昆虫、虾、蟹等节肢动物聚类,最后与脊椎动物类聚。
2、Vg mRNA 时空表达分布。采用荧光定量 PCR 技术检测 Vg mRNA 在不同组织不
同发育时期的表达水平变化,结果显示,Vg mRNA 具有组织表达特异性和性腺发育水平
相关性。Vg mRNA 在卵巢中大量表达,在精巢及其他组织中只有痕量表达;Vg mRNA 在
生长期表达水平较高,在成熟期显著下降,在排卵后期又恢复到较高水平。
3、Vg 与类胡萝卜素含量、总抗氧化能力的关系。通过对卵巢 Vg mRNA 表达水平、
类胡萝卜素含量及总抗氧化能力的测定,发现 Vg mRNA 表达水平与类胡萝卜素含量,Vg
mRNA 表达水平与总抗氧化能力、类胡萝卜素含量与总抗氧化能力之间存在显著的(P <
)正相关性。
4、Vg mRNA 在感染实验中的变化。在雌性个体的性腺中注射 17β-雌二醇,通过荧
光定量 PCR 检测发现其可以诱导 Vg mRNA