文档介绍：上海交通大学
硕士学位论文
雌二醇和血清对MCF-7乳腺癌细胞蛋白质表达影响的研究
姓名:朱镭
申请学位级别:硕士
专业:生物化学与分子生物学
指导教师:李伟
20090201
上海交通大学硕士学位论文
雌二醇和血清对 MCF-7 乳腺癌细胞蛋白质表达影响的研究

摘要

雌激素和血清中的激素及各种生长因子在乳腺癌的发生发展过
程中发挥重要作用。研究雌激素和血清对乳腺癌细胞中蛋白质组成和
含量的影响对于阐明雌激素和血清对乳腺癌细胞影响的分子机理具
有重要意义。它莫西芬(TAM)是临床上广泛用于雌激素反应性乳腺
癌治疗的药物,了解 TAM 对乳腺癌细胞内蛋白质产物水平的影响,
有助于理解其诱导乳腺癌细胞生长阻滞的分子机理。我们利用四重
iTRAQ 标记结合 2DLC-MS/MS 实验分别对雌二醇(E2)、血清剥夺
(SD),和 E2、TAM 单独及联合作用对 MCF-7 乳腺癌细胞内蛋白质
表达的影响进行了研究。
在 E2 和 SD 处理实验中,通过 Q-TOF 串联质谱分析,以不含
E2 的血清培养组为对照,共找到 94 种差异表达在倍以上的蛋白
质,21 种蛋白质在含 E2 的血清培养组上调,16 种蛋白质下调;无血
清培养组找到上调蛋白质 10 个,下调 27 个;含 E2 的无血清培养组
19 个蛋白质上调,22 个下调。在 E2 与 TAM 处理实验中,通过
MALDI-TOF-TOF 串联质谱分析,以未加药物处理组为对照,共找到
表达变化在倍以上的 47 种蛋白质,其中 16 种蛋白质在 E2 处理
组上调,22 种蛋白质下调;TAM 处理组找到上调蛋白质 4 个,下调
8 个;E2+TAM 共同处理组 6 个蛋白质上调,1 个下调。
1
上海交通大学硕士学位论文
比较 ESI-Q-TOF 以及 MALDI-TOF-TOF 对 E2 刺激前后 MCF7
细胞中的蛋白质进行定性和定量的结果,发现两种仪器在蛋白质定性
和定量分析方面有很大的互补性。将两种仪器结合使用,不仅能够显
著提高蛋白质定性和定量分析的覆盖率,而且可以提高分析的置信
度。

关键词:乳腺癌细胞,雌激素,血清剥夺,它莫西芬,iTRAQ 标记,
2D-LC-MS/MS,ESI-Q-TOF,MALDI-TOF-TOF

2
上海交通大学硕士学位论文
Study on the effects of 17-βestradiol and serum on protein
expression in MCF-7 breast cancer cells

ABSTRACT

Estrogen, hormones and growth factors in serum play important roles in
the carcinogenesis and development of breast cancer. To study the effects
of the above factors on ponents and their content in breast
cancer cells is necessary for understanding the underlying molecular
mechanisms. Tamoxifen (TAM) is a drug widely used in the treatment of
estrogen-responsive breast cancer. To study the effect of TAM on protein
expression in breast cancer cells is helpful for understanding the
molecular mechanisms of its role in growth inhibition. In this study,
iTRAQ bined with 2DLC-MS/MS was employed to study
the effects of 17-βestradiol (E2), serum starvation (SD), TAM and
combination of E2+SD, E2+TAM on the expression of diff