文档介绍：成都中医药大学
博士学位论文
广西产美味猕猴桃根抗肿瘤活性成分的研究
姓名:梁洁
申请学位级别:博士
专业:中药化学
指导教师:甄汉深
2007-04
广西产美味猕猴桃根抗肿瘤活性成分的研究
广西产美味猕猴桃根抗肿瘤活性成分的研究
中文摘要
美味猕猴桃为猕猴桃科猕
猴桃属植物。性寒味酸、甘,有小毒,具有清热、利尿、活血、消肿的功效,适用于
治疗肝炎、水肿、跌打损伤、风湿关节痛、淋浊、带下、疮疖等症。现代研究表明,
美味猕猴桃根提取物具有抗肿瘤和保肝作用。但对美味猕猴桃根化学成分和单体成分
药理作用研究未见有公开的报道。为了进一步合理开发利用美味猕猴桃药材,寻找其
有效成分揭示其抗肿瘤作用及其物质基础,并为药材质量标准的制定提供科学依据,
本课题以美味猕猴桃根为研究对象,对其化学成分及其抗肿瘤药效物质基础进行了系
统研究。本课题为国家自然科学基金资助项目《广西五种抗癌中草药有效化学成分和
构效关系的研究》的子课题,项目编号:。
采用查阅有关文献资料、产地、市场调查和标本采集等相结合的方法,实地调查
美味猕猴桃在广西北部地区的分布及民间使用情况。结果显示美味猕猴桃在广西壮族
自治区北部主要分布在全州县、资源县、龙胜县、兴安县和三江县;民间多用于各种
癌症、肝炎等疾病的治疗。
化学成分预试验结果表明美味猕猴桃根中可能含有糖类、黄酮类、蒽醌类、甾体
或三萜类、皂苷、酚类、有机酸等成分。
本课题首次对美味猕猴桃根进行部位分离,对其%乙醇总提取物、石油醚提取
物、乙酸乙酯提取物、正丁醇提取物和乙醇提取物采用法测定了它们各自对宫
颈癌细胞株、人胃癌细胞株、黑色素瘤细胞株、人肝癌细胞株
、小鼠肉瘤细胞株和小鼠肝癌细胞株六种瘤株的生长抑制情况。结果
表明,美味猕猴桃根的%乙醇总提取物、乙酸乙酯提取物和正丁醇提取物具有一定
的体外抗肿瘤作用。对体外初步筛选出的活性部位,又利用和小鼠模型进行了
体内抗肿瘤试验。体内试验结果表明,乙酸乙酯提取物和正丁醇提取物对小鼠移植性
肉瘤有明显的抑瘤活性,并且可延长荷瘤小鼠的生存期,它们还能改善小鼠的
免疫机能。对乙酸乙酯提取物和正丁醇提取物进行了小鼠急性毒性试验,用药前后,
小鼠无异常表现,小鼠对乙酸乙酯提取物的最大耐受量为生药,对正丁醇提
取物的最大耐受量为生药。
对体外和体内抗肿瘤试验筛选出的活性部位,采用柱色谱方法进一步进行系统的
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化学成分分离和纯化,运用熔点测定、、、、、等方法进行结构
鉴定。本课题从美味猕猴桃根乙酸乙酯部位和正丁醇部位分离得到个化合物,鉴定
了其中个化合物,它们分别为:ß-谷甾醇(ß-sitosterol,Ⅰ)、熊果酸(ursolic acid,
Ⅱ)、胡萝卜苷(daucosterol,Ⅲ)、毛花猕猴桃酸 B(eriantic acid B,Ⅴ)、 2a,3ß,
24 -三羟基-12-烯-28-乌苏酸(2a,3ß,24-trihydroxyursa -12-en-28-oic acid,Ⅵ)、 2a,3a,
24 -三羟基-12-烯-28-乌苏酸(2a,3a, 24-trihydroxyursa-12-en-28-oic acid,Ⅶ)、2a,3a,
23-三羟基-12,20(30)-二烯-28-乌苏酸(2a,3a,23-trihydroxyursa-12,20(30)-dien-28-oic
acid,Ⅷ)、2a,3a,24-三羟基-12,20(30)-二烯-28-乌苏酸(2a,3a,24-trihydroxyursa
-12,20(30)-dien-28-oic acid , Ⅸ)、正丁基-O-ß-D- 吡喃果糖苷(n-butyl-O-ß-D-
frutopyranoside,Ⅺ)。分离得到的个化合物均为首次从该植物中分得,其中化合物Ⅺ
首次从猕猴桃属植物中分得。
本课题首次对分离出的个三萜类化合物进行了体外抗肿瘤活性的筛选,采用
法测定了它们各自对宫颈癌细胞株、黑色素瘤细胞株、人胃癌细胞株
和人肝癌细胞株的生长抑制情况。结果表明,熊果酸、毛花猕猴桃酸、
2a,3ß,24-三羟基-12-烯-28-乌苏酸和 2a,3a,24 -三羟基-12-烯-28-乌苏酸具有一定
的体外抗肿瘤作用,因而初步确定熊果酸、毛花猕猴桃酸 B、2a,3ß,24 -三羟基-12-
烯-28-乌苏酸和 2a,3a,24 -三羟基-12-烯-28-乌苏酸为美味猕猴桃根抗肿瘤的活性成
分。
本课题首次采用方法测定了美味猕猴桃根