文档介绍：新疆农业大学
硕士学位论文
牛卵母细胞及胚胎的玻璃化冷冻研究
姓名:霍飞
申请学位级别:硕士
专业:动物遗传育种与繁殖
指导教师:杨焰;陈静波
20060601
摘要率和囊胚率分别为.%和.%,与成熟培养蟮穆涯赶赴钜煜灾,A~憧帕O赴穆涯赶赴AЩ涠车睦涠承Ч虾茫淅涠辰舛程本实验对牛卵母细胞在成熟培养时间、玻璃化液处理时间、玻璃化载体、所带颗粒细胞层数、玻璃化液及浓度龇矫娼辛吮冉涎≡瘢呕伺B涯赶赴牟AЩ涠保存方法。本实验还对牛胚胎在发育阶段、玻璃化冷冻载体的玻璃化冷冻效果进行了研究。逋獬墒炫嘌后的牛母细胞冷冻效果较好,ê蟮穆蚜崖始澳遗呗史直鹞%和.%,囊胚率方面:橛、椴钜旒灾;与椴异显著。煌靥宓亩员龋憾圆A管、:玻璃芎退芰管冷冻效果较好。三种载体的卵母细胞解冻后无论体外受精的卵裂率还是囊胚率均无显著差异..细管玻璃化冷冻效果稍低于AЩ涠撤ǎú钜觳幌灾外受精后的卵裂率和囊胚率分别为.%和.%。囊胚率方面:层颗粒细胞组与不含颗粒细胞组差异显著.~.~,体外培养的囊胚率的对比得出这种组合及配比浓度的牛卵母细胞玻璃化冷冻效果较好。煌⒂逼诘呐L逋馀嘌咛ゲAЩ涠效果得出冷冻牛囊胚效果比冷冻牛桑椹胚效果好。牛囊胚玻璃化冷冻解冻后形态正常率为.%,继续体外培养,孵育率为.%。桑椹胚冻后孵育率与囊胚组差异不显著,但结果低于后者。AЩ涠撑D遗呤笔褂貌A腹堋⑺芰螼管效果较好,但与腹艿牟AЩ涠承Ч钜觳幌灾。可以用管作为牛囊胚玻璃化冷冻的承载工具。通过上述实验为本实验室初步建立了牛卵母细胞及胚胎的玻璃化冷冻体系。关键词:牛,卵母细胞,胚胎,玻璃化冷冻。
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研究生虢象钐帆泐/年孪孺伤时同:Ⅵ。耗其乃日独创性声明关于学位论文使用授权的说明时间:晔本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知,除了文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果,也不包含为获得新疆农业大学或其他教育单位的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。研究生签名:本人完全了解新疆农业大学有关保留、使用学位论文的规定,即:新疆农业大学有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子文档,可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文,允许论文被查阅和借阅。本人授权新疆农业大学将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索,可以公布ǹ论文的全部或部分内容。C艿难宦畚脑诮饷芎笥ψ袷卮诵导师签名:
引言障之一,是加快家畜品种改良和胚胎移植技术产业化的重要组成部分,可代替活畜进口,保种中疾病、自然灾害及战争等因素造成的保种困难;在胚胎的透明带内始终未发现病胚胎冷冻可以远距离运输胚胎,节省人力、物力和财力。哺乳动物卵母细胞和胚胎的冷冻保存技术已经应用在医学、动物学和生物医学等方面。卵母细胞和胚胎的有效冷冻保存是保护品种资源和拯救濒危动物不可缺少的技术保不受时问和空间的限制:通过对卵母细胞的冷冻保存,对探讨低温生物学特性和体外受精机理的研究有着重要意义:通过冷冻保存卵母细胞,不但可以建立雌性动物的基因库,还可以充分利用丰富而廉价的冷冻卵母细胞资源,使体外受精、转基因及克隆等技术的研究应用不受时间和地域的约束。通过胚胎的冷冻保存可以大量回收供体的胚胎,便于迅速挽救那些即将灭绝、数量有限的品种;胚胎冷冻保险系数大,它克服或减轻了活畜原体,完整的透明带对细菌和病毒是一有效的屏障。胚胎冷冻为建立胚胎库奠定了基础。本实验目的:通过牛卵母细胞及胚胎的玻璃