文档介绍：福建师范大学
硕士学位论文
人和小鼠胚胎肺发育关键基因表达模式的比较研究
姓名:王昕
申请学位级别:硕士
专业:发育生物学
指导教师:张彦定
20090501
摘要本实验在研究人胚胎肺发育各阶段组织形态学特征并与鼠胚比较的基础上,研究了部分基因在人胚胎肺早、中期的表达模式,通过与鼠胚的比较,为深入研究人类胚胎肺发育过程的分子调控机制和相关的信号通路奠定基础。首先,本研究检测了人早、中期胚胎肺的形态特征,与同期鼠胚进行比较后发现:人和小鼠胚胎肺发育过程和形态变化极为相似。接着,本实验利用辉咏患觳饬薆、基因在人胚胎肺发育早、中期的表达模式,并与同期鼠胚胎肺进行比较。结果表明:琖在人胚胎肺发育早、中期均有明显表达,并且表达模式与小鼠十分相近。但同时发现和谋泶锬J接胄∈蟠嬖诮舷灾钜欤它们在小鼠胚胎肺上皮或间充质中都有强烈表达,是胎肺分支的重要调控基因。但在人胚胎肺发育的早、中期,均未见的明显表达,蛟谌伺咛シ卧纭中期的上皮中微弱表达。这两个基因在人和小鼠胚胎肺发育中的表达差异,初步显示了人和小鼠在胎肺发育过程中可能存着不同的信号通路和调控过程。此外,本研究首次检测发现谛∈笈咛シ紊掀ぶ星苛冶泶铮砻鞲没蚨蕴シ畏⒂赡起重要作用。在此基础上,本实验以蚯贸∈笪DP停醪降男翁а究发现至时,蚯贸∈蠼弦吧托∈笈咛シ畏⒂倩海漳┑脊仅停留于细支气管阶段,不能进一步分化形成有功能的成熟肺泡。同时检测发现蛟谌伺咛シ沃械谋泶锬J接胄∈笙嘟馑得鱏基因在人胚胎肺发育中所起的作用很可能与蛟谑笈咛シ⒂兴鹱饔孟嗨啤关键词:人,小鼠,胚胎肺,基因表达
新的侧边分支的产生。在肺芽分支过程中,上皮中的渫坊峒せ钗中文文摘哺乳动物肺的发育起源于前肠腹侧的内胚层。肺原基形成后,上皮组织不断生长,并反复分支形成各级气管,支气管至肺泡。哺乳动物胎肺发育可以分为四个阶段:假腺肺阶段、微管肺阶段、囊状肺阶段和泡状肺阶段。肺的发生涉及到许多复杂的分子机制。已有研究表明:、等信号通路对小鼠胚胎肺分支形态发生及瓺轴形成至关重要。诜畏种鹗迹谠抖思涑渲试ざㄆ形成区中表达,随后扩散,与位于上皮的受体结合激活该信号通路,诱导肺芽形成。主要在上皮中表达,并在分支的末端表达最强。它通过局部抑制上皮的增殖,对藕沤懈旱骺兀柚狗种У难由欤佣贾滦路种У愕男纬伞肺上皮末梢的藕偶饶芤种艶的表达,又能激活芴澹佣ü、ǖ骺谾的表达。另外,被盏急泶锖蠡岱垂匆种藕哦俳鳩的表达。因此,在肺芽远端,高水平的虷偷贾赂区域较邻近的间充质有更少的藕牛嗟腇表达。而远离肺芽远端末梢的表达,而间充质中的藕单独作用或与上皮中的黄则会抑制的表达,这就保证了肺芽仅在特定位置出现。非经典通路的藕欧肿覹在经典藕抛饔弥肺发育的中期,肺泡形成时栽抖说姆⒂鹱啪龆性的作用。剔除岬贾绿シ紊掀す确种В汗泶镌虮硐治7种Р蛔悖端气道明显膨大。目前关于这些因子在人胚胎肺发育过程中的表达调控作用和表达模式与小鼠是否接近未有报道。此外,已有报道说对哺乳动物胚胎发育至关重要的同源异型框基因谛∈竺娑畈俊⒅濉⑿脑嘁约肮趋赖姆⒂衅鹱胖匾5牡控作用,肴死嗯咛シ⒂讨兄俊⑷⒈恰⑿脑唷⒅惺嗌窬低车男成有关,但关于该基因基因对哺乳动物胎肺发育的影响及在其信号传导通路中的作为研究人胚胎肺发育的形态学特征,为深入研究人胚胎肺发育过程中各基因的表达调控和作用机制,并为人胚胎肺发育过程中相关疾病的诊断和治疗奠定基础,处低水平的藕旁蚰苡盏剂诮涑渲手懈郌的表达,这就导致肺芽随后用还未见报道。
肺中期均无明显表达;粥用诩傧俜卧缙凇⒛┢诩拔⒐芊沃衅诘姆紊掀ぶ谐饰⑷近一远端轴线侍荻缺泶铮谏掀つ┥冶泶镒钗G苛遥廖⒐芊沃衅冢盐醇鸖本实验首先比较了人与小鼠胚胎肺发育早、中期的形态特征,接着检测了人胚胎肺中相关基因的表达情况,并与同期鼠胚进行比较。同时,本研究首次检测了和蛟谛∈蠛腿伺咛シ沃械谋泶铮⒁許基因敲除小鼠为模型,研究了蕴シ畏⒂挠跋臁B畚闹饕7治R韵铝礁霾糠纸小第一部分,本实验利用组织学的研究方法,根据人胚胎肺来源的时期,取人胚假腺肺早、中、末期及微管肺中期的胎肺进行组织学切片,观察其形态变化特征,并与同期野生型小鼠胚胎肺结构进行比较。组织学结果显示:在人胚假腺肺阶段,肺呼吸树开始发育,形成相互通连的气管和各级支气管,并在细支气管木端再分支形成短管束;到了微管肺阶段,分支的短管束伸长,并进一步向外周分支、扩展形成终末导管,肺泡开始发育,血管开始形成并整合入肺泡上皮细胞之间。在与同期小鼠胚胎肺发育形态进行比较后可以初步得出结论:人和小鼠在胚胎肺发育早、中期形态特征基本相似,这为后续以小鼠为模型研究人类肺部疾病提供了一定的依据。第二部分,本研究利用辉咏患际跫癛姆椒ḿ觳饬斯丶蛟人胚胎肺发育各阶段的表达模式。首先,本实验检测了在小鼠胚胎肺发育中起重要调控作用的龌駼在人胚胎肺早期和中期的表达。