文档介绍：小鼠胚胎雌雄原始生殖细胞发育的比较研究专名称学位申请人指导教师答辩委员会主席答辩委员会成员王美芝田雪梅教授曾园山教授常青教授罗深秋教授李艳萍教授欧阳钧教授组织胚胎学论文评阅人月广州业南方医科大学级硕士学位论文
胞发育的比摘要∈笫潜曜嫉慕幌敌∈螅渑咛テ谏撤⒂墓逃肴说挠行多相同之处,而且遗传背景清楚,便于研究,是胚胎生殖发育研究较理想的生物模式材料。胚胎组织切片标本的制作与观察是研究生殖发育的一个必不可少的重要手段,为形态学研究与免疫荧光技术等研究提供技术平台。目前小鼠胚胎的生殖发育仍有很多难题未被解决,已有的资料大多是通过体外分离培养研究所得,很多体内的发育问题仍困惑着科学家,需要进行更多的研究来解答。∈笕焉锲欤谂咛サ趌熘天之间生殖嵴与原始生殖细胞的发育变化明显可见。天..焓痹忌诚赴蛏翅找贫⒃⒋罅吭鲋场天之后原始生殖细胞在生殖嵴内的增殖完成。接着雌性生殖细胞即开始进入减数分裂,。而雄性生殖细胞则处于静止状态,出生后煸倏J加兴糠至选D壳肮谕夤赜谛∈笊翅张咛シ育形态学研究的全面报道较少,而且很少有研究关注不同性别之间胚胎期生殖细胞发育的区别。本研究以∈、免疫荧光组织化学法以及蛋白印迹分析等方法,研究∈笤熘天之间生殖嵴发育的形态学改变以及雌性和雄性之间原始生殖细胞在数量与增殖率的区别,初步探讨正常∈蟠菩杂雄性原始生殖细胞发育的区别,为生殖胚胎发育的分子水平调控的深入研究提
供了依据。鼠整胚组织切片标本的制作与观察分别取不同天数的小鼠胚胎欤天,天,.欤欤天扛雠咛ト∩倭孔橹疨ḿㄅ咛バ员稹U咦橹捎%多聚甲醛固定液固定,接着从低浓度乙醇开始梯度脱水,二甲苯透明,浸蜡后包埋,连续切片。石蜡块切片后做染色。选择含有生殖嵴的切片,,小鼠胚胎的细胞与组织的形态被很好的展现出来,⑴咛バ员鸱只奶卣饕约霸生殖细胞的形态。结果发现,小鼠胚胎..焐翅盏姆⒂杆佟斓氖笈呱翅找丫形成,且其中可见迁移来的原始生殖细胞。原始生殖细胞体积大,核大且呈圆形或卵圆形。.。.斓氖笈撸坌栽忌」芙峁明显,雌性皮质索孤立细胞团形成原始卵泡。生殖嵴石蜡切片的制作,可以为生殖嵴免疫荧光研究提供材料,为更进一步研究小鼠胚胎生殖发育以及原始生殖细胞的发育提供了实验依据。生殖嵴中原始生殖细胞的免疫荧光组织化学检测雌雄性生殖细胞特异性表达小鼠脉管同系物采用免疫荧光双染的方法用固灞昙窃忌诚赴迷鲋诚赴丝乖琍标记处于增殖中的细胞。从每个胚胎的连续切片中问隔选取张切片进行免疫荧光双染,拍照后截取相同大小的面积,计数粜杂隡与共阳性的细胞数,即原始生殖细胞数与正处于增殖中的原始生殖细胞数。根据后者与前者的比值计算出原始生殖细胞的增殖率。中文摘要一、二、琈Ⅱ
....畂鲋陈试煨坌较雌性.%。三、蛋白印迹法检测生殖嵴中蚉鞍椎谋泶取天、.炫咛サ纳翅眨崛〉鞍鬃龅鞍子〖<觳猓治霰冉洗菩与雄性隤鞍椎谋泶铩=峁⑾,天时雄性生殖嵴内的细胞增殖率较雌性高,与免疫荧光结果大致相同。本实验结果表明小鼠雌性和雄性胚胎的原始生殖细胞发育是有显著区别的。在原始生殖细胞进入生殖嵴且性别分化明显之后、停止增殖之前,即主要在胚胎期天雄性的原始生殖细胞较雌性增殖迅速,且数量上显著高于雌性,这为更进一步研究小鼠胚胎发育过程中原始生殖细胞的基因表达变化以及某些基因敲除后对不同性另鼠生殖的影响提供了实验依据。关键词:原始生殖细胞增殖率生殖嵴形态学,
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