文档介绍:法洛四联征心脏特异性同源盒细胞周期基因抑制性差减杂交聚合酶链式反应二甲基亚砜中英文对照先天性心脏病室间隔缺损房间隔缺损大动脉转位右室双出口上皮一间质细胞转化瓺瓻—畇甌甈南京医科大学硕士学位论文.
专业:虫型望卫蚴作者签名:阻日期:翟型强』:立至墨际η┟涸趟科▆日期:本论文垡型鲤丝:§基垦垒£基圈查盘氢壁膛:兰壁筮论文独创性声明直垫猩主吐窒盘姿丝盈塞滏是我个人在导师指导下进行的研究工论文使用授权声明生作及取得的研究成果。论文中除了特别加以标注和致谢的地方外,不包含其他人或机构已经发表或撰写过的研究成果。其他同志对本研究的启发和所做的贡献均在论文中作了明确的声明并表示了谢意。本人完全了解南京医科大学有关保留、使用学位论文的规定,即:学校有权保留送交论文的复印件,允许论文被查阅扣借阅;学校可以公布论文的全部或部分内容,可以采用影印、缩印或其它复制手段保存论文。保密的论文在解密后遵守此规定。旦南京医科大学硕士学位论文
第一部分疦基因在大鼠胚胎心脏发育过程中的表达南京医科大学硕士学位论文·
摘要检测疦基因在大鼠胚胎心脏发育过程中的取大鼠胚胎、心脏,采用半定量反转录聚合酶链反应技术检测心脏组织中疦基因的表达丰度,并应用免疫组化的方法对其进行蛋白定位分析。在大鼠胚胎、心脏中,疦基因均有表达,且呈逐渐上调趋势;其蛋白主要表达于心房、心室壁和肌小梁等处心肌组织,而在心内膜、心外膜、瓣膜、流出道、大血管等处未见表达。【结论】疦基因的表达随大鼠胚胎心脏的生长发育逐渐上调,且特异表达于胚胎心脏心肌细胞的细胞核,与心脏发育密切【关键词】疦基因;大鼠;胚胎;心脏;发育表达变化及其蛋白定位。【结果】相关。【目的】【方法】南京医科大学硕士学位论文
—/..;籩籬..疦,.,—
选取、为检测时间点,通过汲免疫组化的脊椎动物的心脏是胚胎发育过程中最早形成并行使功能的器官,其发生是一个极其复杂的过程,从一开始多细胞系的特化,到后来线性管状结构的形成,以及最后发育成成熟的四腔结构,此过程由多种基因在不同时间和空间上的顺次精确表达参与完成【D壳耙证实一些基因,特别是心脏特异性转录因子,在心脏发育中起到枢纽作用【浚庑┗虻娜毕莼岬贾孪忍煨孕脑嗖等基因的缺陷会引起房间隔缺间隔缺损珼,右位心,大动脉转位,,法洛四联症取蛔。因此从基因和分子水平研究胚胎心脏发育,.从而解释先天性心脏病的致病机制是目前国内外研究的热点之一。.蚴切脑嘧钤缣匾煨员泶锏淖B家蜃樱殖莆P脑嗵异性同源盒畇基因家族中Ⅻ勉型成员之一。⒂逼其表达变化及定位情况的研究主要停留于早期阶段。由于大鼠胚胎组织是发育研究领域中被广泛采用的实验材料【,其中第、E咛バ脑喾⒂型砥诘墓丶奔涞恪】,,以更深一步认识其在胚胎心脏发育中的作用,报告如前珻鏩、、、、,,室,,右室双出口猳荖屯言下:南京医科大学硕士学位论文
;雄鼠只,体重雌鼠只,体重鹤陨虾K估晨耸笛槎镏行摹R辜雌雄按簂合笼,次晨分笼,见脱落阴栓视为,并分别在孕胎,显微解剖镜下用显微镊子取出心脏。不同孕期的孕鼠宫内的多只胎鼠心脏一半做,一半做免疫组化。组迅速将组织置于液氮中保存,免疫组化组置于ザ嗑奂兹┲泄潭ā材料好拦鶬好拦鶶公司美国:北京天为时代科技有限公司铮河擅拦鶬镉邢薰竞铣碇堑缬臼约粒琼脂糖:西班牙电泳缓冲液孕信渲恋缬旧涎撼逡海罕本┨、、酶:.南京医科大学硕士学位论文
.主要仪器贤夥止夤舛纫:美国仪甔瓽好拦鶥公司缬疽稳流稳压褐泄暇┥松锛际跤限公司贤馔干浞瓷浞治鲆型褐泄虾?:购自美国备趸锩副昙堑耐每股窖蚨梗汗鹤员本┲猩拦显色试剂盒购:购自武汉博士德公司庖咦榛约梁校汗鹤晕浜翰┦康鹿椭票簊荆獯罄犹逑晕⒕担簅荆毡羲胶阄路跸洌荷虾>ê暌瞧鞒研究方法采用方法测定大鼠胚胎心脏发育过程中疦基脂糖凝胶电泳,应用旒扑慊枷裆璺治鱿低巢舛╖因和虻缬咎醮芏戎担訥为内参照,计算::用法抽提细胞总亢笕孀B汲蒻螅俳蠵扩增,
.总樘采用蛕一步法抽提总砌叮僮鞑街枞缦:疦基因的相对含量,结果以疦条带占醮芏鹊陌俜致%硎尽‰水:去离子水,剧烈震荡使之溶解,定容至,室温静置过夜后高压,密封保存。.罷:睿鹚幔铀觤褂们断∈:畸解寤叶В煸群℃避光保存。/.溶液配制:冰上称取胚胎心脏组织匀浆后转至管颠倒混匀下,室温种胄种’上南京医科大