文档介绍：中国农业大学硕士学位论文摘要
摘要
雪花莲凝集素基因基因是目前防治刺吸式口器害虫危害的一种较为理想的抗性基因。
将基因插入质粒中的基因的上游,得到植物表达载体,并将该表达
载体导入农杆菌,构建用于植物基因转化的双元表达载体系统。基因与基因构
成融合基因并共用一个启动子,可通过组织学检测基因的表达,分析区基
因向植物细胞染色体的转导和整合情况。本实验目的就是利用构建的双元表达载体系统,寻找一
种经济有效的方法研究首楷功能基因转化的可行性。
农杆菌浸泡植物种苗的转化方法不需要组织培养及植株再生,是摸索一种新型、快速、方便
的基因转化方法的有效尝试。本论文以模式种截型盲藉为实验材料摸索浸泡法转化植物的各种条
件。以吸附的农杆菌菌量为指标,综合种子的催芽时间,接种菌液中表面活性剂的浓度及种苗在
菌液中的浸泡时间等三个方面的因素,摸索出农杆菌处理的最佳条件,即用含表面活性剂
的农杆菌菌液浸泡在℃催芽的首稽种子分钟
另外,通过对农杆菌在植物细胞壁上的吸附、基因的表达及基因的瞬时表达的研究,
初步探讨了该法对截型首稽遥传转化的可行性。显微镜观察结果显示,农杆菌能够进入植物细胞
间隙,并在细胞壁上形成细菌的集结同时发现诱导剂蔗糖和乙酞丁香酮等可明显刺激基因
的表达组织学检测表明基因在处理种苗上的瞬时表达效率超过。植株长出第三片真叶
以后,在一些幼苗根部仍能检测到,绍基因的表达。因此,通过直接浸泡的简单处理,外源基因
能够进入截型首稽细胞核中并得到有效表达。
此外,应用紫花首稽的一些普通栽培品种为实验材料,并采用浸泡法研究基因转化时发现,
实验的个品种中,只有个品种检出了荃因表达的蓝斑,并且渭南首箱表达效率最高,
为,但远低于模式种的基因表达效率。这说明适合于截型盲楷转化的各种条件并不能
直接应用于紫花首楷的所有品种,在实际应用中,使用该方法的合适条件将有待进一步研究。
关键词种苗浸泡法,雪花莲凝集素基因,根癌农杆菌,首稽,瞬时表达效率
中国农业人学硕七学位论文摘要

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中国农业人学硕士学位论文摘要
独仓生声明
本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成
果尽我所知,除了文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含其他人已经发
表或撰写过的研究成果,也不包含为获得中国农业大学或其它教育机构的学位或证书
而使用过的材料。与我一伺工作的同志对本研究所做的任何贡献均己在论文中作了明
确的说明并表示了谢意。
研“生签“尹夕时间, 知年‘月日
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研究生签名时刀夺年‘月日
导师签名时间之呼年‘月夕日
中国农业大学硕士学位论文第一章前台
第一章前言
转基因抗虫植物的研究进展
长期以来,植物病害和虫害使农业生产蒙受严重损失,农作物产量损失的三分之一可归因于
病害,而植物虫害也使全世界每年大约损失数千亿美元等,,据等
统计全球粮食每年因虫害造成的损失达,如果作物不打农药可造成的产量损失分析是棉花
、水稻、小麦。在我国这些病虫害每年可造成水稻减产在以上小麦减产近
棉花减产在以上曾林等,
人类通过使用农药,采用高水平的生产管理技术和培育、种植抗病虫害的作物品种等手段,
与病原、害虫进行了长期坚持不懈的斗争。虽然从中取得了长足之进,但治理病虫害的过程中,
过度地依赖某单一方式甚至给我们带来了新的问题。例如通常使用的农药是化学农药,它们在农
业生产中的确起到了重要的作用,但同时也带来许多严重问题化学农药在食物中的残留,
以及在人类食物链中的积累,不仅危害人体健康,而且造成严重的环境污染。化学杀虫剂的
作用方式是非特异性的。在杀灭害虫的同时,也使有益的昆虫相害虫的天敌受到毒害,从而危及
多种生物资源,破坏生态平衡。这种危害在当时可能并不突出,但随着时间的推移会使人类逐
渐蒙受难以估计的损失。化学农药的长期使用使病原体逐步产生抗性。目前己出现了几百种
对杀虫剂有耐性的害虫,病虫害抗药性的产生迫使人们不断增加农药的使用剂量和研制新的药
剂。大剂量农药的使用,使前述问题更加