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流式细胞术分析及应用.ppt

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流式细胞术分析及应用.ppt

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流式细胞术分析及应用.ppt

文档介绍

文档介绍:流式细胞术分析及应用
.
1
流式细胞术的原理
流式细胞术的应用
流式细胞术的数据处理
流式细胞术的样品制备
主 要 内 容
.
2
流式细胞仪(Flow Cytometer):是集光电子物理,光电测量,计算机,细胞荧光化学,单抗技术为一体的高科技细胞分析仪。
流式细胞术(Flow Cytometry):利用流式细胞仪对处于快速流动的细胞或生物颗粒进行多参数、快速(每秒可达1000-10000个)的定量分析和分选(纯度可达99%以上)的技术。
一、流式细胞术的原理
.
3
现代流式细胞仪包括
液流系统
聚焦细胞以供检测
光学系统
激发和收集光信号
电子系统
将光信号转化为电信号,并使其数字化以供计算机分析
.
4
液流系统
液流系统将样本悬液聚焦在光源的中心处
.
5
Sample Flow in Optical Cuvette
Sample
Laminar Flow
Low Sample Flow Rate
12 mL/min
Sheath
Sheath
Sample
Laminar Flow
Sheath
Sheath
Optical Cuvette
High Sample Flow Rate
60 mL/min
.
6
样品和鞘液流
.
7
Injector
Tip
Fluorescence
signals
Focused laser
beam
Sheath
fluid
.
8
流式细胞仪的光学系统
激光 (Laser)是一种相干光源,它能提供单一波长、单一方向、同步的稳定光照。
激光波长: 台式机为固定波长488nm, 635nm ,大型机波长谱线宽包括 325, ,488, ,,,, 633,647 nm
光收集系统是由若干组透镜,滤波片,小孔组成,将产生的光信号引导至检测器。
.
9
流式细胞仪的光信号
散射光信号
荧光信号
.
10