文档介绍：江南大学
硕士学位论文
女贞过氧化物酶分离、纯化及酶学性质研究
姓名:王瑧
申请学位级别:硕士
专业:生物化学与分子生物学
指导教师:廖祥儒
20080401
摘要过氧化物酶琍,.是广泛存在于各种动物、植物和微生物体内的、其结构和作用机理并不完全相同的一类含血红素的氧化酶,,,以及女贞果实糠置秆从女贞果实中分离得到一种炕贪ㄔ冉⒘,纯化倍数为,回收率4优暌吨释馓宓鞍字蟹掷氲玫降ヒ惶醮腜,分子量女贞叶置妇哂薪细叩娜任榷ㄐ裕嫦录尤富钍SァT妗酶活完全丧失,℃,%。女贞果实/,具有多种生理功能。论文以女贞质。.ィ肿恿课为℃、℃、℃水浴中加热一小时后,剩余酶活都在%以上。在℃下处理粗酶最适为。℃加热富罱鍪Sィ嫦麓的值为瓵和甐两种短肽能明显提高女贞果实嫦氯任榷ㄐ浴疞海藻糖也能有效提高该酶热稳定性,.环糊精对纯化后的挥忻飨宰饔茫訮活性表现出抑制作用。关键词:过氧化物酶;分离纯化;酶学性质;女贞/
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、激素蚁等盏夹蚚、温度、盐胁迫诱导型取4友芯拷嵌瓤矗┠昀炊机乖镏实难趸从Γ植物过氧化物酶是最早在医学、化学检测中得到应用的酶之一,目前己在其分类、组织定位,细胞壁结合态桓菟掷朊傅纳砉δ芎痛呋匦栽蚩煞种D局仕豍、抗坏血酸⒍覣氧化酶、酚氧化酶、细胞色素凸入赘孰腜等:根据表达方式可分为组成型陀盏急泶镄蚉,其中诱导表达型职ㄋ鹕擞盏夹、病菌诱过氧化物酶琍,.广泛存在于各种动物、植物和微生物体内,一般含血红素、铁或铜等金属离子【。它主要催化由过氧化氢或有机过氧化物参与的各种谢蛭反应过程可简单描述为【浚———◆即:过氧化物酶经过两电子氧化而成为化合物:焖馗ɑ湮X⒀衾胱踊拧K婧蠡衔颕经过单电子还原成化合物。化合物突衔颕际蔷哂写呋钚缘闹屑浠衔铩6加幸桓鯢甇结构并存在于有机基团中,这种有机基团或者是氨基酸残基,或者是卟啉。分离纯化、酶学性质和生理功能等多方面展开研究,得到了许多有意义的结果。按不同的标准可将植物殖刹煌嘈汀F渲校菝傅鞍椎鹊绲愕拇笮】⒐入赘孰腜和抗坏血酸揉剩桓葜参锢丛床煌煞治@备⒎裀、花生鹊龋桓萁岷献刺煞治?扇芴⒗胱咏岷咸凸布劢岷咸琍伸展蛋白数涉及对阴离子、阳离子和中性牟煌肿犹匦浴⑸砉δ堋⒀G逖Ч叵导盎虮泶锏骺氐谋较研究上。不同种类的っ复嬖诿飨缘淖橹推鞴偬匾煨裕渲锌够笛K酨分别存在于叶绿体和细胞质内,二者在组成、结构、底物专一性、对底物的亲和力及在纯化过程中的稳定性上均有差异。木质素啻嬖谟谙赴谀冢矶郟可存在于细胞膜、细胞器、细胞质及质外体内。根据其组织特异性常被称为线粒体⒁堵烫类囊体、液泡⒅释馓錚和胞内等【———◆!!!鬋———◆。.
存在有关【恰D承┩っ冈趐,甚至个别同工酶在比跃哂サ幕钚浴4影赘掷氲肿咏峁固氐化反应特性介于细胞色素和在茎和叶中则不存在【】。等㈣的研究显示,从小麦上分离的诱导型蛴个内含子,且恢侄嘤傻ヒ浑牧从脒策钩傻难:焖氐鞍,脱辅基蛋白分子须与血红素结合才构成全酶。但不同的:焖亟峁勾在一定差异,如肼萈的血红素在结构上存在差异,,暴露的边缘促进了电子转移反应;而后者则为硫化轴配体浯5卜⑾窒妇穆萈不需卟啉和金属离子即可催化产生抗真菌化合物蚿多数植物苡胩