文档介绍：广州医学院
硕士学位论文
胚胎干细胞建系及造血分化潜能的研究
姓名:黄盛昌
申请学位级别:硕士
专业:免疫学
指导教师:孙筱放
20090501
胚胎干细胞建系及造血分化潜能的研究中文摘要第一部分小鼠胚胎干细胞建系及人孤雌胚胎干细胞的培养鉴定硕士研究生:黄盛昌指导老师:孙筱放教授、高绍荣研究员第一章小鼠胚胎干细胞建系研究目的建立小鼠胚胎干细胞系,为下一步造血分化提供原材料。材料与方法褂/雌鼠和蠼薪ㄏ怠∈蟮奶氐闶腔騉笕芎狭基因栽贓赴谖捶只那榭鱿履芄环⒊雎躺ü狻ㄏ捣椒ㄓ氤9娼ㄏ倒桃谎喝〉.煸惺笞庸逑醋庸竦媚遗撸接种到饲养层上;第旌筇羧】寺∠ù结果我们将见栓后第天的/小鼠处死,取出子宫,冲洗后获得个胚胎,其中囊胚有觯i┡哂个,质量比较差的胚胎鱿纸隙嗟乃槠有觥S赡遗叻⒂吹某晒ㄆ株细胞系,建系率为%:桑椹胚的没有成功建起细胞系。最后对其中一株细胞系进行鉴定,结果都符合细胞的特性结论我们建立的小鼠胚胎干细胞系符合细胞的特性,具有自我更新以及多向分化的潜能。关键词:胚胎干细胞建系;小鼠
第二部分胚胎干细胞的造血分化第二章人孤雌胚胎干细胞的培养以及鉴定研究目的通过对人孤雌胚胎干细胞信嘌ǎ莆杖伺咛ジ上赴嘌能,同时了解人孤雌胚胎干细胞的一些生物学特性。材料与方法晒阒菀窖г旱谌绞粢皆焊狙兴峁┑娜斯麓婆咛ジ上赴怠ù椒ǎ菏褂媒涸赶ê突捣ā=涸赶ㄊ屎吓嘌笾锌寺∩比较旺盛,状态比较好的情况下;机械法适合于培养皿中分化细胞比较多,或克隆比较少的情况。颐嵌詐赴辛薕形成试验;核型分析;约盎チ鼋屑觳狻结果细胞能表达、、、、戎副辏荒芄恍纬;核型为,;觳庀允居牍┱咭恢拢换チ龅侥壳盎姑挥屑觳獬隼础结论细胞的培养条件与正常人的细胞没有明显区别;通过检测其生物学特性,发现这株细胞的核型异常,而且致瘤性不强。关键词:人孤雌胚胎干细胞;第一章核移植小鼠胚胎干细胞的造血分化潜能对核移植来源的小鼠胚胎干细胞性煅7只教炙脑煅7只潜能。、砒■:胚胎干细胞建系及造血分化潜能的研究
材料与方法瓼赴丛从/雌鼠与凼蠼慌浼ê;赴丛从/∈筘和璧囊恢滋养细胞泻艘浦埠蠼ㄏ祷竦茫〉赴实验。只讨校捎迷し只怀醪椒只唤徊椒只牟街杞性煅7只M过对分化过程中各项指标进行比较,来说明两者的异同。煅R浦玻杭觳庥烧饬街晗赴只吹脑煅8上赴谔迥谑欠窬哂性煅G能。结果瓻纬赡芰Γ篘和在总和造血形成的数目分别是:魇较赴欠治鼋峁涸诜只牡、欤琋细胞分化成和双阳性细胞的比例分别为:ァァィ籉赴谋壤直鹞#觳庀允荆喔鲈煅O喙鼗蛟诹秸叻只讨械谋浠魇苹一致。瓸匝橄允荆琋细胞能够形成爆发集落。煅R浦布觳饨峁允荆毫秸咴谔迥诙寄芄环⑸煅!结论核移植来源的与受精来源的小鼠胚胎干细胞在体内外几乎具有一样的造血分化潜能。关键词:胚胎干细胞;核移植;拟胚体:造血分化;和、。胚胎干细胞建系及造血分化潜能的研究.%、.%、.%。甊
第二章初步探讨匀死嗯咛ジ上赴煅7只挠跋研究目的初步探讨在人类胚胎干细胞造血分化过程中的作用。为造血移植提供参考信息。材料与方法晒阒菀窖г旱谌绞粢皆焊狙兴峁┑膆赴辍笛榉殖组:只添加分化基础培养基添加常规细胞因子常规细胞因子,采用机械法进行接种。将切成块状的克隆切片接种到超低吸附培养皿中孔板靠状蟾沤又块克隆切片。辈捎妹赶ㄓ牖捣ń行翁У谋冉希戳秸咴贓姆⒂鲜欠裼结果魇较赴欠治鱿允荆琧组、组和组分化至第天时,幌赴谋壤直鹞.%、ァ.%;细胞的比例分别为ァ.%、ィ籆细胞的比例分别为ァ.%和ァ甤组、组和组的造血集落形成数目分别为没捣ù砗蠼又中纬傻腅翁湫投曳⒂己茫幻赶ù砜寺『螅不易于形成。结论芄幌允敬俳鴋细胞的造血分化活性。⒃趆细胞形成的过程中,机械法比酶消化法更有利于的形成。关键词:;人类胚胎干细胞;造血分化区别。胚胎干细胞建系及造血分化潜能的研究
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