文档介绍：弱毒疫苗株蛋白转导功能研究博士生:陈鸿军导师:秦爱建教授国家自然科学基金资助项目嗪牛学年痵扬州大
本研究利用无致病性的/呙缰昀┰鼋基因,结果发现其弱毒疫苗株蛋白转导功能研究博士生秦爱建教授摘陈鸿军导师要同毒株的即刀基因。将锟寺载体并测序分析,结果发现:强毒株株、超强毒株和特超强毒株的即刀长度保持獵醵株的印刀基因巳笔创嬖谝桓氨基酸残基的缺失性突变:设计特异性引物,扩增全长阡、~、末端区抖。篴~、缺失说腣日:基因与偷ゴ筐逭畈《同源,编码病毒被膜蛋白,《颈荒さ闹饕3煞帧O忠阎な担琈播有着非常重要的作用。确⑾諱转导功能。等研究发现端缺失霭被幔础癟埃訡鞍鬃5脊δ艿难芯拷峁可作为一种高效便捷的蛋白转运工具,对于弥补庖呷毕煌虏⌒吐砹⒖耸喜〔《綱鞍椎男蛄斜冉虾头治/辍辍旰辏琈攴直鸶腥狙寂叱上宋赴蚣ε叱上宋赴鱿执罅靠瞻呤保崛株序列设计引物,成功扩增出弱毒疫苗株羧基端原核表达及特异性抗体的制备的羧基端区域:盖蠵产物,⑾郑篤获得了高效可溶性表达。甈掷胙粜蕴醮捎们薪好庖呋蛴糜盏己蟮南妇呀獾血清吐砹⒖耸喜〔《,主要产生赴榈嫉南赴庖哂Υ稹和提高治疗性物质的转导效率具有非常重要的意义。株和总8菁悍⒈淼腗=獴示:用。陈鸿军:俊皊
阡朋舴直鹂寺∪雙—转移载体中,通过与队W螅细胞间转导。研究结果表明,一孩鵶磗哂星痹诘胞核中扩散:利用杂交瘤技术研制出昕筕奶匾煨缘タ寺】固澹种不同抗原表位,┛固宓某晒χ票肝I钊在真核系统中的表达和鉴定系统中表达这些目的基因。结果成功构建了全长及多种缺失片段重组杆状病甐.。利用单抗和多抗对这些突变体进行鉴定,结果发现:能与甐反应;而单抗苡朐贑一赴性萏泶锏腣反应,学特性完全不同。这为下一步深入研究不同区域的功能和细胞摄入试验提供蛋白转导功能的研究蛋白转导功能和效率,本研究通过将所有上述转导效应,且单独表达的嗑哂邢赴渥5脊δ埽洳荒苄鳨核定位特性,对转导功能的发挥意义很大;—影响细菌上清混合弗氏佐剂免疫小鼠后,制得抗阳性血清。用该抗体检测感染腃中的表达,结果发现:最早在感染后即可向所有细、、C庖哐匦约ń峁允荆赫庑┑タ怪辽僬攵粤研究蛋白转导功能提供了必要的生物材料。设计特异性引物,┰鯲—和阡■一,将这些铩⒉煌局、和株、取经过筛选的白色菌落提取重组杆状病毒H菊胮昆虫细胞,在畉瓸毒,分别命名为:甐—.、甐猇——ú也不能与从ΑU庑┫窒笏得髡饬街甑タ顾淙豢赡芫攵訴,但免疫了修饰完整的天然抗原为了进一步证实不同缺失型的与相融合,转染猯细胞,通过间接免疫荧光方法,检测的蛋白转导现象。结果发现,.具有微管结合、核膜结合、核酸结合、蛋白转导等特性:然而,更倾向于结合细胞内膜。治龇现:与株的转导效率相当,且只有完整长度的具有最高效的携带目的蛋白转导的功能。细胞摄入试验发现:各种表达的均具有的胞浆定位及蛋白转导效率。因此,.和作为细胞间转导的扬州大学博士学位论文
,均定位于所有细胞核。这为转导功能与免疫增强作用之间的关系研究奠定了基础。增强蛎庖咝Ч钠兰细胞扩散,和⒃谟诎校碫訴没有明显的蛋白转导作用,炊跋霽谙赴诘恼6ㄎ弧Mü∈蠊伤耐芳∶庖咦⑸涠嗑垡烯基亚胺穆阒柿/蠨免疫,以间接定固逍Ъ郏現觳釺细胞亚类结果发现,虽然并没有明显促进奶逡好庖哂Υ穑煤煜赴呀庖毫呀饣竦玫牧馨拖赴秩好挥忻飨郧穑但利用淋巴细胞分离液分离的脾细胞经分群后发现:∈驝疌细胞的比例与柿C庖咦橄啾仍銮浚差异不显著,攵哉兆橄啾炔钜煜灾。这暗示可能与奶匾煨韵赴庖叻从π栽銮肯喙亍关键词:马立克氏病病毒;/醵局辏槐荒さ鞍祝籚坏鞍鬃5辅助区域,对其转导功能的发挥具有重要意义。这一发现为利用携带其他目的蛋白转导,增强目的蛋白免疫原性及其治疗性功能具有重要的指导价值。并不能携带所有蛋白质在细胞间转导,本研究选取禽流感病毒Ⅳ基因、牛⒓Υ拘苑ㄊ夏也〔《基因、鸡传态表达。觳饨峁⑾郑河隫诤系腃诎谐什豢扇艿耐趴椋与融合的远ㄎ挥诎校襈端融合或巳诤系淖H窘峁相似,证明⒚。结果表明:并不能促进蛑芪醋H功能弱毒疫苗株蛋白转导功能研究陈鸿军:
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