1 / 53
文档名称:

小菜蛾泛素基因克隆及其与溴氰菊酯抗性关系研究.pdf

格式:pdf   页数:53
下载后只包含 1 个 PDF 格式的文档,没有任何的图纸或源代码,查看文件列表

如果您已付费下载过本站文档,您可以点这里二次下载

分享

预览

小菜蛾泛素基因克隆及其与溴氰菊酯抗性关系研究.pdf

上传人:1006108867 2014/7/21 文件大小:0 KB

下载得到文件列表

小菜蛾泛素基因克隆及其与溴氰菊酯抗性关系研究.pdf

文档介绍

文档介绍:保密论文注释:本学位论文属于保密论文,密级:——保学位论文作者签名:多次宏期::砩、:所提交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作和取得的研究成果。本论文中除引文外,所有实验、数据和有关材料均是真实的。本论文中除引文和致谢的内容外,不包含其他人或其它机构已经发表或撰写过的研究成果。其他同志对本研究所做的贡献均已在论文中作了声明并表示了谢意。学位论文作者签名:研究生在校攻读学位期间论文工作的知识产权单位属南京师范大学。学校有权保存本学位论文的电子和纸质文档,可以借阅或上网公布本学位论文的部分或全部内容,可以采用影印、复印等手段保存、汇编本学位论文。学校可以向国家有关机关或机构送交论文的电子和纸质文档,允许论文被查阅和借阅。C苈畚脑诮饷芎笞袷卮斯娑密期限为年。指导教师签名:日期:
摘要以上结果表明,胄〔硕赇迩杈挣タ剐杂泄兀耸识雀弑泶锘岫韵小菜蛾属于鳞翅目菜蛾科,是十字花科蔬菜的主要害虫之一。化学防治是控制害虫的一个重要手段。随着杀虫剂的大量使用,小菜蛾对多种杀虫剂产生了抗药性,杀虫剂抗性已成为病虫害防治工作中的一大障碍。发现和研究抗药性相关基因将有助于阐明抗药性的分子基础和寻找新的抗性靶标。本实验室采用代表性差异分析发现泛素基因在小菜蛾溴氰菊酯抗性和敏感品系中出现差异表达。泛素钦婧讼赴衅毡榇嬖诘男》肿拥鞍字剩浠竟δ苁峭ü核兀蛋白酶体途径高效选择性降解蛋白质。泛素在调控细胞生长、细胞周期调控、细胞凋亡以及信号转导中发挥着重要作用。泛素基因是否在害虫抗药性中发挥作用以及发挥着何种作用,目前尚未见报道。本文在前期研究的基础上,以小菜蛾四龄幼虫为实验材料,克隆了小菜蛾泛素基因家族各成员,,的基因序列,通过活体水平扰,蟮捅泶锖拖赴降南赴H镜确椒ǎ芯糠核囟凿氰菊酯抗性的影响。主要结果如下:〔硕闡的开放阅读框为,编码霭被岵谢旱趌至黾罨嗦敕核氐鞍个氨基酸到黾罨嗦牒颂翘宓鞍譒霭被。的开放阅读框为,编码霭被岵谢G个氨基酸为泛素蛋白,后个氨基酸为核糖体蛋白。蚒于泛素核糖体融合蛋白。凳庇ü舛縋结果显示,泛素核糖体融合基因在抗性品系四龄幼虫中的表达量显著上调。聊琔后,实时荧光定量笛橹っ鞲缮嫘试嘉ァ随后通过生测实验测定扇藕蟮男〔硕昕剐云废悼挂┬员浠榭觯教侄咧间可能存在的关系。结果显示扇臮后,与对照组相比,干扰组小菜蛾对溴氰菊酯的抗药性水平显著下降,从而揭示胄〔硕赇迩杈挣タ剐韵喙亍玌转染进果蝇细胞,使其在果蝇细胞中高表达,并使用试剂盒进行细胞毒力实验。结果表明,在一系列溴氰菊酯浓度梯度的刺激下,转染组细胞的存活率相对于对照组细胞有明显升高。胞产生抗溴氰菊酯的保护作用。这是泛素基因与昆虫抗药性相关的首次报道,为进一步阐明杀虫剂抗性的分子机制和建立抗药性检测方法提供了新的科学依据,具有,
重要的理论意义和潜在的实际应用价值。关键词:小菜蛾,溴氰菊酯,抗药性,泛素,实时荧光定量琑干扰,细胞转染,摘要
《,琣.,.琣,,,琲瑆【...,..琧,琩.,甌
,,.,.—.,瑃%.,.,.,篜,琿琑,,
目录摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一第滦髀邸小菜蛾抗药性的形成和发展⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.〔硕甓阅獬婢挣ダ嗌背婕恋目挂┬浴.〔硕甓园被姿狨ダ嗌背婕恋目挂┬浴.〔硕甓员锦;謇嗌背婕恋目挂┬浴.〔硕甓杂谢桌嗌背婕恋目挂┬浴.〔硕甓訠背婕恋目挂┬浴.〔硕甓陨巢隙舅氐目挂┬浴昆虫抗药性机制的研究进展⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯?⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯。.生理生化抗性⋯⋯⋯⋯⋯一⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯....斜昕剐浴窬嵬荒评胱油ǖ馈阴5ḿ铛ッ0被∷崾芴濉抗药性的防治策略⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..化学防治⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一扇旁诶コ婵挂┬灾械挠τ谩第滦〔硕攴核鼗虻目寺∮攵糠治觥实验材料⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..。.。。。....。......。.。...。。。...,。..。。...,...。.。......。。....,,...。...,,..............。.........】Ⅱ
.┦孕〔⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..〔⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..产物纯化、疉克隆和测序⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.序列比对