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●目录小菜蛾酚氧化酶原基因目寺基因序列的生物信息学分析⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯小菜蛾不同发育时期两种酚氧化酶的表达研究⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯槲皮素/曲酸处理后小菜蛾的表达研究⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯峁敕治觥小菜蛾酚氧化酶原基因目寺ぁ小菜蛾蛐蛄械纳镄畔⒀Х治觥小菜蛾蛐蛄械纳镄畔⒀Х治觥本研究下一步拟开展的工作⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯崧邸慰嘉南住滦弧ザ裂黄诩浞⒈砺畚那榭觥中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯英文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯浴牧嫌敕椒ā试验试虫饲养⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯试剂及仪器设备⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯小菜蛾总奶崛⒓ḿ癱铣伞ぁ小菜蛾总奶崛致邸铰肌■●‘●
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鳞翅目昆虫基因具有较高的同源性‰.;基因‰.。捅要两种典型的抑制剂——槲皮素和曲酸,对小菜蛾溆壮娼辛说愕究结果如下:甈ǔ蛄杏,包含一个的开放阅读框桓的潜嗦肭疷鸵桓的带有加尾信号的潜嗦肭疷?7旁亩量虼拥个核苷酸开始,终止于第个核苷酸,由其推导的氨基酸序列以甲硫氨酸为起始氨基酸,长为霭被幔肿恿课啦獾鹊绲鉷.。的半衰期为不稳定系数为.,化学分子式为尾信号的潜嗦肭疷?7旁亩量虼拥龊塑账峥J迹罩于第个核苷酸,由其推导的氨基酸序列也以甲硫氨酸为起始氨基酸,长为霭被帷姆肿恿课啦獾鹊绲鉷.。奶逋獍胨テ谖,不稳定系数为.,化学分子式为被嵝蛄斜榷苑治鼋峁砻鳎琍虻陌被嵝蛄杏肫渌的氨基酸序列与其它鳞翅目昆虫基因也具有较高的同源性酚氧化酶,.,简称惴捍嬖谟诙铩植物和微生物等生物体内,是昆虫体内的一种重要酶类,在昆虫变态发育和免疫系统中起着重要作用,如斡氡砥さ挠不秃诨对卵壳的鞣化作用;斡肷撕Ψ烙加速伤口的愈合等。本文通过和技术,克隆得到了编码小菜蛾酚氧化酶原的两个基因蚉翰⑼ü齋和芯苛薖蚉谛〔硕瓴煌⒂逼诘谋泶锴榭觯煌笔褂处理,测定了处理后和鍪奔涞鉖谋泶锴榭觥Q山东农业大学硕士学位论文—\、
表达量最高,.:在溆壮嬷斜泶锪课.;在龄、浜陀贾蟹直鹞衔=咏诔沙中的表达量较低,设定为,.;在溆壮嬷斜泶锪课.;在浜龄幼虫中分别为陂纹に睾颓岽嬖诘奶跫拢琍淖B蓟钚跃玫讲煌关键词:小菜蛾:酚氧化酶:昆虫免疫;荧光定量甈蚉骶哂辛礁龈叨缺J氐耐胱咏岷衔坏悖位于铜离子结合位点内的霰J氐淖榘彼岵谢送猓拱桓隼嗨于脊椎动物的荆耷虻鞍椎牧螋撬狨デ颉隤腘端均不含信号肽,不存在跨膜结构域。.%,随机卷曲占.%,它们是最大量的结构元件,延伸链占.%,散布在整个蛋白质中,无=存在;中,荆菪ィ婊砬ィ亲畲量的结构元件,而延伸链占.%,散布在整个蛋白质中,无=谴在。同源建模显示二者三级结构均为“甜汀械摹肮鐾步峁。.。度的抑制。小菜蛾酚氧化酶原编码基因的分子克隆表达及其功能研究.“一一’
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文献综述结合,只有极小部分以游离形式存在龋徽曰崛ǖ龋。一般以无活性的酶原琍问酱嬖冢饕2斡肷及其它多酚化合物的形成龋篠等,7氧化酶具有独特的双重催化功能,是生物体内黑色素合成的关键酶,与人体的衰老、伤口愈合,昆虫的发育,果蔬的褐变有密切关系龋等,:,6嗄昀矗友趸敢恢笔艿窖踅绲密切关注,其研究涉及化学、生物、医学、药学、农学等多个学科和领域。.友趸傅钠鹪血蓝蛋白虽然和酚氧化酶都是含铜的蛋白质等。其功能是作为氧的载体而不是催化氧化还原反应。在节肢动物的甲壳类、螯肢动物和多足类三个纲中,血蓝蛋白以细胞外寡聚体的形式存在,与软体动物血蓝蛋白的结构不同但功能相似。节肢动物血蓝蛋白第一个铜结合位点偷诙鐾岷衔坏非常相似,即陌被序列与睦嗨啤H硖宥镅@兜鞍字挥性贑区显示与节肢动物血蓝蛋白的高度相似性龋。节肢动物的酚氧化酶含有节肢动物血蓝蛋白虲的相应位点龋,并且序列相似,似乎是同源的蛋白质。但是相比之下,酚氧化酶与软体动物血蓝蛋白的同源关系更为密切龋,软体动物血蓝蛋白的虲区分别与酚氧化酶虲区的氨基酸序列相似,并且在每一个铜结合位点,除了三个组氨酸外,还有几个氨基酸也是保守的,这进一步证明了软体动物血蓝蛋白和酚氧化酶之间存在密切的同源关系等,昆虫在进化过程中形成了复杂的气管系统,可以直接把空气中的氧气酚氧化酶,殖评野彼崦浮⒍酚氧化酶等,包括单酚氧化酶和多酚氧化酶,是结构复杂的多亚基的含铜氧化还原酶龋籗等,9惴捍嬖谟诙铩植物、微生