文档介绍：中国科学院上海生命科学研究院
博士学位论文
黄芪和苦豆子有效成分抗病毒性心肌炎作用及机制研究
姓名:张媛媛
申请学位级别:博士
专业:生物化学与分子生物学
指导教师:丁健;黄成钢
20060601
黄芪和苦豆子有效成分抗病毒性心肌炎作用及机制研究中文摘要病毒性心肌炎韵录虺芕饕S煽氯娌《等引起,是以心肌细胞变性坏死、间质单个核细胞浸润为主要病变的一种临床常见病,严重危害人类健康。柯萨奇病毒属于小《疲Φ啦《属,根据在翥鼠中引起的病理状态不同而分为两族,其中骞灿鲅切停珺括鲅切汀?氯鍮《,以下简称且餠的最主要病原体。目前临床尚无针对奶匾煨缘囊呙绾椭瘟埔┪铮嗖捎米酆霞奥疗法,包括抗病毒、营养心肌、免疫调节及对症治疗等。近年来,中医药在疗矫嫦允境龊艽笄绷ΑR恍┲幸缁栖危诹俅采铣3R缘ノ兑┮方粗提物形式应用,如黄芪口服液、芪冬颐心口服液等,收到一定治疗效界但至今仍缺乏有效成分和作用机理明确、药效显著、剂型先进的现代中药。经多年研究,本课题组从黄芪和苦豆子中提取分离出对邢灾瘟用的有效部位和单体有效成分。本文采用动物模型、细胞模型和血清药理学、药代动力学及分子生物学等方法,分别对黄芪中的黄芪总苷、黄芪甲苷、毛蕊异黄酮葡萄糖苷和苦豆子中的槐定碱等成分进行研究,观察其对的体内外抑制作用,对锏拿庖叩鹘谧饔茫┪锏奶迥诠蹋约爸瘟芕的药摘要
理作用机制等,取得以下主要结果:⒒栖巫苘赵贖一赴赴霸嘌募∠赴隙訡哂明显抑制作用,∞分别为.,.,和./;对副流感病毒和、苷连续天,死亡率、心指数、病毒滴度、血清蚅含量、心肌细胞浸润和坏死程度等指标均较模型组明显降低;黄芪总苷还可明显提高感染小鼠血清溶血素剑岣呋妨柞0酚盏嫉拿庖吖δ艿拖滦∈蟮钠ⅰ⑿叵僦数和巨噬细胞吞噬功能。初步机理实验结果表明,黄芪总苷可明显降低鼠血清中和浚岣逫含量。这些研究结果表明,黄芪总苷是黄芪治疗挠行Р课弧⒒栖渭总帐腔栖巫苘罩械脑碥绽嗟ヌ宄煞帧L迥谑笛榻峁砻鳎栖渭苷可显著降低感染小鼠的发病率、死亡率、心指数和心肌病毒滴度;血清药理学实验结果表明,大鼠口服黄芪甲苷/笃浜┭G蹇擅飨越低感染的原代培养心肌细胞的病毒滴度;—觳饨峁砻鳎贸煞挚显著提高∈笮募∽橹械腨干扰素—表达量,这可能是黄芪甲苷抗病毒和治疗幕浦唬庖蛔饔没砦醇ǖ馈N颐堑难芯柯这一研究结果表明,黄芪甲苷是黄芪抗挠行С煞种弧⒚镆旎仆\帐腔栖巫苘罩械幕仆@嗟ヌ宄煞帧L逋馐笛榻峁砻鳎成分在原代培养心肌细胞上对具有明显抑制作用,∞为./,治疗指数为.,明显高于临床常用抗病毒药病毒唑瘟浦甘体内实验结果表明,∈蠊辔父杳镆旎仆\杖芤痥痥、也有明显抑制作用;给予感染小鼠口服和痥栖巫文已发表在《摘要》::。
能显著降低感染引起的∈蟮乃劳雎剩灾档推湫闹甘行Ы档∈笱G逯蠰和暮俊U庑┭芯拷峁砻鳎镆旎仆\帐腔栖慰和治疗闹饕S行С煞种唬馐歉没衔镆├碜饔玫男路⑾郑究题组已申请发明专利。⒒倍ḿ钍强喽棺拥戎幸┎乃泥道镂鬣だ嗌锛畹ヌ宄煞帧L逋馐验结果表明,槐定碱能显著降低感染的原代培养心肌细胞的病毒滴度,翮为./,治疗指数为T贑腥镜腂痗小鼠模型上,槐定碱能明显降低病毒感染引起的急性期和慢性期的死亡率、心指数、心肌组织的病毒滴度和心肌病理切片的炎性浸润和坏死程度。血清药理学实验结果表明,大鼠口服槐定碱/蟮暮┭G蹇上灾档虲染的原代培养心肌细胞的病毒滴度。这些实验结果表明,槐定碱是苦豆子抗的有效成分之一。药代动力学实验结果表明,大鼠口服种雍蠹纯纱友G逯检测到原形药物,分钟后血药浓度达到最高峰/婧罂J枷陆担种邮毖R┡ǘ茸畹/分钟时血药浓度又达到一峰值痬,此后一直呈下降趋势。相应的血清药理学实验结果表明,给药分钟后的含药血清即有抗作用,两次血药浓度高峰时的含药血清对原代培养心肌细胞上的抑制率也最高,┦鼻哂胧毙呶呛稀S纱送撇猓倍ḿ钤谔内是以原形结构发挥抗和治疗饔玫摹狿检测结果表明,槐定碱可显著提高∈笮募∽橹衁干扰素桶捉樗豬表达量,降低肿瘤坏死因子表达量,提示该成分抗和治疗淖饔猛揪吨唬赡苁峭ü鹘谏鲜鱿赴蜃颖泶锒迪值摹;倍ḿ摘要
抗作用及机制未见报道,本课题组已申请发明专利。将药代动力学与血清药理学研究结合进行,是具有创新意义的实验方法。我们的研究论文已发表在综上所述,本文对黄芪中的黄芪总苷、单体成分黄芪甲苷、毛蕊异黄酮苷和苦豆子中的单体成分槐定碱等有效部位和有效成分在抗和治疗饔及机制方面进行了研究,确定黄芪总苷为黄芪抗及治疗挠行Р课唬黄芪甲苷和毛蕊异黄酮葡萄糖苷是主要有效成分;槐定碱是苦豆子抗及治疗闹饕S行С煞帧5鹘贗猧、猀等细胞因子和机体免疫功能可能是上述成分治疗淖饔猛揪吨弧U庑┭芯拷峁=徊娇7⒄对性治疗病毒性心肌炎的现代中药奠定了初步的药理学基础。关键词:病毒性心肌炎,柯萨奇病毒,黄芪总苷,黄芪甲苷,毛蕊异黄