文档介绍：第二节***化酶
Methylase
Methylation
***化酶同限制性内切酶具有完全相同的识别顺序。***化酶使识别顺序中的某个碱基发生*** 化，保护DNA不被限制性内切酶切开。
真核生物中目前只发现5■***胞喀喘(M5C) o M5C占整个胞卩密噪中的2〜7% (果蝇和某些昆虫例外)o M5C大多以M5CpG的形式存在，不同物种或同一物种的不同组织中，M5C出现的频率也不尽相同。
将限制性内切酶和***化酶同时作用，可使有儿种可能识别顺序的限制性内切酶只对其中一种识别顺序有效。
例如限制性内切酶Aval的识别顺序是:
5’ CPyCGPuG 3’
3’ GPuGCPyC 5’
Py可以是任何一种卩密唳，pu可以是任何一种卩票吟。因此可以有4种识别顺序。如果同时使用***化酶Taq I和甲基化酶Hpa II,则Aval的识别顺序将只是
5’ CCCGAG…•…3\
如果有一个DN***段，有Aval的3个识别顺序，当用 Ava I处理后可得4个片段。可是，如果先用Taq I甲基化酶和Hpa II***化酶使DNA顺序中的有些碱基甲基化，然后再用Aval去切，结果只有1个识别顺序可被Aval作用，只产生2个DN***段。
1、***化酶的种类
在真核和原核生物中存在大量的 ***化酶，
在Ecoli中大多数都有三个
位点特异性的DNA***化酶
***化酶
DNA Adenine methylase
GATC
腺卩票吟N6位置引入***
PvuH BamHI Bell BgHl Xholl
Mbol Sau3AI
识别位点中含GATC序列
° CbI(l/4) XZmI(1/16) 7hql(l/16)
MboU (1/16) 砂 1(1/16) 部分识别序列含GATC序列 4个Chi位点(ATCGATN)中有一个该序列
有些限制酶对Dam***化敏感不能切割相应的序列
如:Bed、Clal, Mbol. Xbal 等这;***化敏感的限制性内切酶.
不敏感的有
Bam HI, Saw3Al, BgZII, P*u\等.
Mbol和Sau3AI识别和切割位点相同，但其差异就在
一般哺乳动物DNA不会在A-N6上***化
当需要在敏感位点上完全切割DNA时, 必须