文档介绍：基因工程的基本操作程序
基因工程培育抗虫棉的简要过程：
提取
棉花细胞(含抗虫基因)
苏云金芽孢杆菌
抗虫基因
与运载体DNA拼接
导入
普通棉花(无抗虫特性)
棉花植株(有抗虫特性)
基因工程的基本操作程序
一、目的基因的获取
二、
三、将目的基因导入受体细胞
四、目的基因的检测与鉴定
基因表达载体的构建
一、目的基因的获取
1、目的基因：
2、获取方法：
主要指的是编码蛋白质的结构基因，也可以是一些具有调控作用的因子。
（1）从基因文库中获取目的基因；
（2）利用PCR技术扩增目的基因；
（3）通过DNA合成仪用化学方法直接合成
（一）从基因文库中获取目的基因
？
将含有某种生物不同基因的许多DN***断，导入到受体菌的群体中，各个受体菌分别含有这种生物的不同基因，称为基因文库。
基因文库
基因组文库
部分基因文库
（cDNA文库）
基因组DNA文库
cDNA文库
基因组DNA文库与cDNA文库的比较
补：原核细胞的基因结构
非编码区
非编码区
编码区
编码区上游
编码区下游
与RNA聚合酶结合位点
启动子
终止子
RNA聚合酶能够识别调控序列中的结合位点，并与其结合。
转录开始后，RNA聚合酶沿DNA分子移动，并以DNA分子的一条链为模板合成RNA。
转录完毕后，RNA链释放出来，紧接着RNA聚合酶也从DNA模板链上脱落下来。
①不能转录为信使RNA，不能
编码蛋白质。
：能转录相应的信使RNA，能
编码蛋白质
编码区
非编码区
原核细胞的基因结构
②有调控遗传信息表达的核
苷酸序列，在该序列中，
最重要的是位于编码区上
游的RNA聚合酶结合位点。
非编码区
非编码区
编码区
编码区上游
编码区下游
启动子
终止子
补：真核细胞的基因结构
编码区
非编码区
非编码区
与RNA聚合酶
结合位点
内含子
外显子
能够编码蛋白质的序列叫做外显子
不能够编码蛋白质的序列叫做内含子
启动子
终止子
编码区上游
编码区下游
内含子：
外显子：
真核细胞的基因结构
编码区
非编码区
外显子：能编码蛋白质的序列
内含子：不能编码蛋白质的序列
：有调控作用的核苷酸序列，
包括位于编码区上游的RNA
聚合酶结合位点。
非编码序列：
包括非编码区和内含子