文档介绍：第三军医大学
博士学位论文
内毒素结合肽EBP基因的克隆表达及其内毒素拮抗效应研究
姓名:麻莉
申请学位级别:博士
专业:病理学与病理生理学
指导教师:刘友生
20030501
内毒素结合肽虻目寺”泶锛捌淠诙舅剞卓剐вρ芯要摘残荩之,共含有个氨接酸。为了寻找一种拈抗内毒素活性更高,且体内应用安全胞活性评价的基础上,初步观察它在烧伤合并内毒素⒍锬P椭卸曰宓谋;ぷ握誑甃的序列,针‘对其匾旖岷锨颍菀锷杓圃虿研究表明,妇诙舅兀嗵,介导的细胞激活反应和琇的参与。难G逄堑鞍祝浠蛴鐾庀訽了编码,结合位点在其氨基末端,与的结合位点在其羧基末端,,鹱糯呋糯驦启动单核/巨噬细胞分泌炎性介质和细胞因子的作用。经修饰改造的氨皋端脂多糖结合蛋白狶且恢址钟枇课⒑星代分予的霭被岬亩嚯模芨行У亟岷螸,但不能转移紺度分泌。~区域加以适当改建,并最大限度地利用大肠杆菌偏爱的密码了,设计新的内毒素结合珽蚱危煌ü蚩寺〉确椒ǎ≡裨吮泶锵低常刑目的蛋自进行分离纯化,初步获得育活性的人内毒索结合肽N颐窃谔逋庀=窈蠼降牧俅灿τ玫於ɑ簗V饕Q芯磕谌菁敖峁缦拢诙舅亟岷想腅基因的克隆及原核表达载体的构建按构建肺锼厝诤系鞍妆泶镌靥宓囊G螅杓埔欢砸铩I嫌我镏泻蠬识别位点,我镏泻辛礁鲈讼赴悦苈肓耍馍鐱侗鹞坏恪院琋狶全长的质粒为模板,进行┰,无杂带;弧慰焖倩厥帐约梁薪谢厥铡内切酶处理的一靥褰辛构建瓻表达载体。筛选刚性重组了,,,进而抑制单核/巨噬细胞炎性介质和细胞因子的过·靠的内毒素拈抗剂,本研究丰荼ǖ赖娜薔蛐蛄校谄涮匾斓腖结合利川韵拗菩阅谇忻窰、盏锊⒂胂嗤拗菩ū泶镌靥遄;蟪Ω司鶧·阳客豢蒲й竺顃
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在各时相点的含量均有不同程度的下降,提示赡芤种苧觳舛镅G逯泄缺0泵的动念变化。结果提示,模型组大鼠錋水平较正常对照组显著升高;治疗组大鼠的血清胶湍P妥橄啾洒档停ǚ巍⒏巍⑸鲎橹谐9媸破旧ḿ暗缇抵蒲⒐鄄臁=峁允治疗组中盯细胞的变性、坏死程度减轻,炎细胞浸润减少;肿组织毛细【管充胺泡间隔的炎性改变也有不同程度减轻;肾小球毛细【艹洹緁减轻,肾小管上皮细胞变综上所述,本研究通过基因克隆等方法,采用原核表达系统经融合表达出内毒素结合肽⒍阅康牡鞍捉辛擞行У姆掷搿⒋炕赴逋夂投镌谔迨笛榈某具有一定的拮抗淖饔茫P滦湍诙舅亟岷想牡墓δ苎芯康於肆己玫幕关键词:脂多糖结合蛋白;脂多糖:内毒素结合肽;基凼克隆;原核表达;融合蛋白;包涵体;蛋白纯化;生物活性;拈抗效应作用,从而减少了等相关炎性细胞因子和介质的释放。明肝脏功能较模型组有所好转。性、坏死减少。步观察,我们认为该内毒素结合肽是具有一定的生物活性的重组蛋白,并初步观察到它第三军医大学博士研究生论文
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