文档介绍：东北农业大学
博士学位论文
大豆组织培养体系优化与双价抗虫基因遗传转化的研究
姓名:王萍
申请学位级别:博士
专业:作物遗传育种
指导教师:杨庆凯
大豆组织培养体系优化与双价抗虫基因遗传转化的研究褚龆ū钡厍髟院凸庖氪蠖够蛐偷奈闯墒熳右丁⒄嬉丁⒆右督诤虵胚基因被转入到大豆中,并对影响遗传转化的因子进行了研≯饕Q芯拷峁鏔:因已整合到大豆基因组中,转化率依大豆品种、农杆菌菌液浓度、侵染时间和哄培养时摘要胞胚胎发生的因子大豆基因型、外植体种类、生长素种类与浓度、低温预处理时间,以及与大豆体细胞胚胎发生率有关的性状的相关性进行了研究;诱导大豆次生胚产生,探讨了与胚性组织增殖、萌发和再生植株有关的因子,优化了大豆组织培养再生体系。基因和艋蛩ḿ劭钩婊虻囊糯;璓和猄琱治鲋っ魉ḿ劭钩岳闯墒熳迂ξM庵蔡宄晒Φ赜盏剂龃蠖够蛐吞逑赴咛シ⑸急挥发生率在%以上的基因型觥4蠖刮闯墒熳右妒怯盏继逑赴咛シ⑸詈玫耐庵蔡澹以高浓度的诱导体细胞胚胎发生效果更好。在诱导大豆体细胞胚胎发生时基因型⒘耸屎嫌诙ū钡厍蠖蛊分治闯墒熳右短逑赴咛シ⑸胫仓暝偕淖橹培养体系,培养基成份、生长素的种类和浓度、低温预处理时间等因子对大豆不同品种的体细胞胚胎发生率均有影响。培养基附加高浓度的书,加或不加有机物酸和腺嘌呤诮又智敖ù蠖褂准栽低温预处理商岣叽蠖刮闯墒熳右短R耍⒂氪蠖蛊分值纳谟泄兀高的体细胞胚胎发生率。菇艘源蠖刮闯墒熳右段M庵蔡逵盏忌洗竺婊耘嗟拇蠖蛊分植紊胚,在固体培养基上增殖胚性组织,并再生结实植株的组织培养新体系,研究中发现胚性组织的增殖与蔇浓度和光照条件有关。钊搿⑾低车匮芯苛丝股囟源蠖蛊分稚し⒂囊种谱饔谩?敲顾刈魑?剐选择标记所需浓度因不同大豆品种、不同外植体嬉丁⒆右督凇⑾屡咧帷⑽闯墒熳右和胚性组织⑼庵蔡宀煌⒂锥体细胞胚胎发生、胚萌发和再生植株饕欤化范围为~/2煌┡└司暝谇秩敬蠖共煌庵蔡搴笏柰丫恋闹类和浓度亦不同,淖罴淹丫廖M锋呙顾鳎ǘ纫劳庵蔡宓牟煌~了遗传转化,诱导体细胞胚胎发生和植株再生,移栽成活株,株觳獬恃粜反应,用地高辛标记尉基因探针进行猄治觯昃恃粜裕っ鳎间不同变化在.%之间,平均转化率为ァE└司榈嫉拇蠖挂糯;手饕轴为外植体,用高浓度的生长素诱导大豆体细胞胚胎发生与植株再生,对影响大豆体细以大豆未成熟子叶和胚性组织为受体,用农杆菌和基因枪两种方法对大豆进行历导基因型的.%。在黑龙江、吉林和辽宁三省主栽的大豆基因型中筛选出体细胞胚胎间存在较大的差异,体细胞胚胎发生率在ブ洹细胞胚胎发生率。接种时大豆未成熟子叶以旱、中熟品种在大豆开花〖裕硎炱分衷诖蠖箍;〖钥苫竦媒门└司榈挤ǘ陨髟源蠖蛊分旨A⒓A秃铣闯墒熳右督/工萍年』、
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把研究的目的和意义文献综述用传统的杂交育种方法进行抗病、抗虫育种,由于抗源匮乏,对大豆品种改良的效果欠生产的成本,还使生态平衡遭到了严重的破坏,造成环境污染。当眭期使用农药时,使随着分子生物学的发展和植物转基因技术的应用,使人为定向将有益的目的基因转移到农作物中以提高其抗性和改良品质成为可能,也为大豆的品种改良提供了有效手段。继获得成功。大豆的转基因植株虽然在年等用根癌农杆菌介导法和等用基因枪法脖换竦茫虼蠖沟淖橹嘌逑瞪胁煌晟疲蠖棺橹耘└司还敏感等原因,使大豆的遗传转化研究进展缓慢,成为世界性难题。因此,进一步深入研究影响大豆组织培养的诸多因素,优化和完善大豆组织培养体系,建立高效、稳定的大豆遗传转化系统,对利用基因工程的方法提高大豆的抗病、抗虫能力和改良大豆的品质大豆的组织培养与植株再生大豆的组织培养研究始于二十世纪六十年代,但各种外植体的组织培养与再生植株的培养相继再生植株成功。早在六十年代,妹阜ǔ晒Φ胤掷氤龈叩戎参镌侍搴蟛痪茫陀胁簧研究工作者试图用豆科植物进行原生质体的分离和培养。,也是重要的食物蛋白来源与工业和饲料原料。在大豆生产过程中,常