文档介绍：《生物技术类大实验》实验指导书 2009 年9月1日前言《生物技术大实验》是为生物技术专业本科高年级学生开设的综合实验课程, 是在普通生物学实验、生物化学实验、微生物实验、细胞生物学和遗传学实验的基础上的综合实验课程。该实验课程偏重于分子生物学实验教学, 通过此实验课程, 学生不仅学****到最基本的分子生物学技术,而且学****到前沿的生物技术。分子生物学实验技术突飞猛进,日新月异。分子生物学技术的广泛应用,在 20 世纪下半叶对生命科学的进步产生了举世公认的巨大推动作用, 而且对人们的生活和整个社会的发展亦产生了巨大的冲击和影响。分子生物学技术已广泛渗透和应用到生物学、遗传学、细胞学、微生物学、进化学、肿瘤学、免疫学、药理学、发育学、病毒学、神经生物学、生药学、法医学等与基础医学和临床医学有关的研究领域。 21 世纪将更是分子生物学技术快速发展的时期,由此引起的生物技术革命并将更加深刻地影响社会的发展。学生基本技能和动手能力的培养都离不开实验室, 离不开实验课上的训练, 很多理论上的原理都需要到实验课上去验证, 很多理论上的知识都需要到实验课上去实践。而实验课教材或实验指导书是开好实验课的基本条件之一。虽然目前的分子生物学实验教材版本众多, 但针对本科生的生物技术大实验教材尚无出版。为了加强本学科的教材建设, 促进本学科实验课的开设, 我们参考了国内外最新的有关分子生物学实验技术的专著, 根据我校学生的特点及我们自己现有的基础和条件, 特选择了部分实验内容, 并结合我们的经验与体会, 汇编成了生物技术大实验实验指导书,以供参考。在使用过程中,可根据不同的层次适当增减。同时,对于新近产生和应用前景广阔的生物芯片技术、 RNAi 技术和蛋白质组研究等,限于我们目前的条件,只能作些演示或作为动态给以介绍,条件一经成熟,即行开设。由于分子生物学技术和生物技术的快速发展,加之我们是第一次这样系统地给学生开设生物技术大试验课程, 许多工作还处于不断探索的过程中, 难免有不妥和疏漏之处, 恳切期望读者提出宝贵意见,以利不断修正完善。目录注意: 值日生的任务是协助实验准备及实验室卫生清扫, 具体工作时间和任务由负责研究生安排( 平时可能要做一些实验准备, 如预实验、配液等。要求必须提前 30 分钟到实验室) ,老师监督并作为平时成绩考核。时间安排,每次课 6-8 学时,周三 8: 50-15 : 50;周四8: 50-13 : 50, 周六 8: 50-16 : 50; 周日 8: 50-16 : 50; 有些实验时间可能增加, 视实验任务而定。无特别安排暂定周六 1 班和周日 2 班,有变动商议后提前告知。实验 1、从动物组织中提取基因组 DNA ( 刘小龙, 徐鹏如)【值日生: 06-1 班蔡晗、陈作深、陈顺艳、邓大标; 06-2 班戴殷、邓科源、邓修康、高甘梅】实验 2、 PCR 扩增基因特异片段(刘小龙,徐鹏如) 【值日生: 06-1 班蔡晗、陈作深、陈顺艳、邓大标; 06-2 班戴殷、邓科源、邓修康、高甘梅】实验 3、 DNA 片段的回收及纯化(何伟璇,熊接华)【 06-1 班冯剑平、甘燕贞、霍嘉玲、李鉴清; 06-2 班邓勇、黄晓灵、贾小艳、李慧莹】实验 4、 PCR 产物的 TA 克隆(何伟璇,熊接华)【 06-1 班冯剑平、甘燕贞、霍嘉玲、李鉴清; 06-2 班邓勇、黄晓灵、贾小艳、李慧莹】实验 5、感受态大肠杆菌细胞的制备( CaCL2 法) 与质粒转化( 王瑞晓, 汪元梅)【 06-1 班李宝红、李仕勇、林世亮、刘成模; 06-2 班胡博、李丽坤、李晓鹏、李雯榕】实验 6、 PCR 法快速鉴定重组载体(菌落鉴定) (王瑞晓,汪元梅)【 06-1 班李宝红、李仕勇、林世亮、刘成模; 06-2 班胡博、李丽坤、李晓鹏、李雯榕】实验 7、质粒的提取和纯化(蔡伟光,肖敏)【 06-1 班刘青、罗龙清、罗月明、王光真; 06-2 班李炫、梁惠娟、梁礼健、梁勇】实验 8、质粒 DNA 的电泳和纯度检测(蔡伟光,肖敏)【 06-1 班刘青、罗龙清、罗月明、王光真; 06-2 班李炫、梁惠娟、梁礼健、梁勇】实验 9、限制性内切酶酶切法鉴定重组质粒. (杨林,柒启恩)【 06-1 班田朝阳、邬黎、王斌、王娟娟; 06-2 班林鑫城、饶靖、司徒昭韵、孙文俊】实验 10、外源基因表达载体的克隆( 杨林, 柒启恩)【 06-1 班田朝阳、邬黎、王斌、王娟娟; 06-2 班林鑫城、饶靖、司徒昭韵、孙文俊】实验 11、外源基因在大肠杆菌中的表达( 赵增阳, 程晓)【 06-1 班徐国华、徐小珊、姚光宇、余凌冰; 06-2 班涂子璐、徐建、许佳俊、杨志强】实验 12、目标蛋白的 PAGE 检测(赵增阳,程晓)【 06-1 班徐国华、徐小珊、姚光宇、余凌冰; 0