文档介绍：一、多酚氧化酶研究概况多酚氧化酶( polyphenol oxidase,PPO )是自然界中分布极广的一种金属蛋白酶,普遍存在于植物、真菌、昆虫的质体中,甚至在土壤中腐烂的植物残渣上都可以检测到多酚氧化酶的活性。由于其检测方便,是被最早研究的几类酶之一。自 1883 年 Yoghid 发现日本漆树液汁变硬可能和某种活性物质相关, 1938 年 Keilin Mann G. 研究了蘑菇多酚氧化酶的提取和纯化,得到多酚氧化酶并将这类酶称为 polyphenol oxidase 。多酚氧化酶又称儿茶酚氧化酶,酪氨酸酶,苯酚酶,甲酚酶,邻苯二酚氧化还原酶,是六大类酶中的第一大类氧化还原酶。多酚氧化酶的共同特征是能够通过分子氧氧化酚或多酚形成对应的醌。在广义上,多酚氧化酶可分为三大类:单酚单氧化酶( 酪氨酸酶 tyrosinase,) 、双酚氧化酶( 儿茶酚氧化酶 catechol oxidse,) 和漆酶(ase,) 。在这三大类多酚氧化酶中,儿茶酚酶主要分布在植物中,微生物中的多酚氧化酶主要包括漆酶和酪氨酸酶。现在大部分文献所说的多酚氧化酶一般是儿茶酚氧化酶和漆酶的统称。编辑本段二、多酚氧化酶在自然界的分布 1 植物中的多酚氧化酶及作用在植物( 如苹果、荔枝、菠菜、马铃薯、豆类、茶叶、桑叶、烟草等) 组织中, PPO 是与内囊体膜结合在一起的, 天然状态无活性, 但将组织匀浆或损伤后 PPO 被活化, 从而表现出活性。在果蔬细胞组织中, PPO 存在的位置因原料的种类、品种及成熟度的不同而有差异,绿叶中 PPO 活性大部分存在于叶绿体内[7] ;马铃薯块茎中几乎所有的亚细胞部分都含有 PPO ,含量大约与蛋白质部分相同[8] ; 在茶叶中的 PPO 分为游离态和束缚态, 前者主要存在于细胞液中属可溶态 PPO , 而后者则主要存在于叶绿体、线粒体等细胞器中,与这些细胞器的膜系统或其他特异部位结合呈不溶态[9] , .(1990) 研究了茶树新梢中 PPO 活性及多酚含量对红茶品质的影响,发现 PPO 活性强,多酚含量高,对红茶品质有利,相反则利于绿茶的生产[10] ;新鲜的苹果中,多酚氧化酶几乎全部存在于叶绿体和线粒体中。从这两部分分别制备的 PPO , 其底物专一性稍有差异[11] 。刘乾刚认为, PPO 在细胞内除了存在于叶绿体及线粒体上外,细胞壁也可能存在 PPO ,且对发酵产生影响,细胞只要轻微破损便有 PPO 的作用。多酚氧化酶是一种质体酶,有些研究人员认为多酚氧化酶可能仅存在于质体中[12] ,缺乏质体的组织就不存在多酚氧化酶,例如筛管和筛胞等,但是有质体的组织也可能没有多酚氧化酶,如 C4 植物叶。含有质体的植物组织不一定都存在多酚氧化酶,而多酚氧化酶一定在含有质体的植物组织中。随分子生物学的发展,象西红柿、苹果等的多酚氧化酶的基因已被克隆。浙江大学赵东等[12] 对茶树多酚氧化酶的克隆及其序列进行了比较。从已经克隆的多酚氧化酶的基因看,均属于基因家族,多则 6-7 个基因。这些基因的表达具有时空差异和组织特异性( PPO 在幼龄组织中表达, 在成熟组织中不表达),表明多酚氧化酶的基因在植物中所起的作用不同。高等植物组织发生褐变主要是 PPO