文档介绍：实验八、 3, 5- 二硝基水杨酸测定总糖 1 .在样品的总糖提取时,为什么要用浓 HCl 处理?而在其测定前,又为何要用 NaOH 中和? 总糖测定是建立在还原糖的测定的基础上的,经 HCL 处理是为了将所有的非还原糖水解还原成还原性糖, 经过测定还原糖含量确定总糖含量。用 NaOH 中和是因为 HCL 会消耗菲林试剂,所以必须要先中和来消除其影响 2. 标准葡萄糖浓度梯度和样品含糖量的测定为什么要同步进行? 时间差别大, 吸光度会产生较大误差, 虽然溶液在一定时间范围内是保持相对稳定的, 但是分光光度计本身存在局限性,要求时间不能太长。 3. 比色测定的操作要点是什么?方法的基本原理是什么? 操作要点: 1.. 用相同型号的比色管。 2. 配制等体积的系列标准样品。 3. 配制待测样品(与标准样品等体积)。 4. 对比, 找出相同的浓度。基本原理:基于被测溶液的颜色显色剂后生成的有色溶液,其颜色强度和物质含量成比例。溶液中的物质在光的照射激发下,产生对光的吸收效应。型分光光度计的原理及使用时的注意事项是什么? 原理: 72 型分光光度计的基本依据是朗伯—比耳定律,它是根据相对测量原理工作的,即先选定某一溶剂作为标准溶液, 设定其透光率为 100% , 被测试样的透光率是相对于标准溶液而言的, 即让单色光分别通过被测试样和标准溶液, 二者能量的比值就是在一定波长下对于被测试样的透光率。注意事项: 1. 保持其干燥,且不能置于高温环境使用。 2. 定期使用,日常维护工作中要定期更换仪器的硅胶。 3. 每次装入比色皿的溶液不要过满, 一般装 2/3 即可, 并在每次倒溶液时应小心操作, 减少对进光面的擦洗次数, 以防进光面磨损而影响透过率。 4. 分光光度计是计量仪器, 必须定期检定或校准, 若经修理后必须重新检定, 经检定合格后方可使用。 5. 比色测定时为什么要设计空白管? 减除溶液的差异,以便消除实验的误差。 6. 3,5- 二硝基水杨酸比色法是如何对总糖进行测定的? 黄色的 3,5- 二硝基水杨酸( DNS ) 试剂与还原糖在碱性条件下共热后, 自身被还原为棕红