文档介绍：β-半乳糖苷酶染色试剂盒
简介：
β-半乳糖苷酶染色试剂盒(β-Galactosidase Staining Kit)是一种基于衰老时SA-β-Gal (senescence-associated β-galactosidase)活性水平上调而对衰老细胞或组织进行染色检测的试剂盒。在普通的光学显微镜下就可以观测到细胞或组织的衰老情况。绝大多数正常细胞被认为仅有有限的分裂能力，在不能分裂后就进入衰老状态。此时细胞仍然是存活的，但细胞的基因和蛋白的表达谱发生了很大改变。
Leagene β-半乳糖苷酶染色试剂盒以X-Gal为底物，在衰老特异性的β-半乳糖苷酶催化下会生成深蓝色产物，光学显微镜下很容易观察到变成蓝色的表达β-半乳糖苷酶的细胞或组织。本试剂盒仅染色衰老细胞，对衰老前的细胞(presenescent cells)、静止期细胞(quiescent cells)、永生细胞(immortal cells)或肿瘤细胞等不会染色。对于组织切片或组织块，可以检测的样品数量视样品的大小而定，对于普通的切片也至少足够检测100个样品，使用6孔板测定，足够测定100个样品。
组成：
编号
名称
DE0021
100T
Storage
试剂(A): β-半乳糖苷酶染色固定液
100ml
4℃
试剂(B): X-Gal溶液
5ml
-20℃ 避光
试剂(C): β-半乳糖苷酶染色液A
1ml
4℃ 避光
试剂(D): β-半乳糖苷酶染色液B
1ml
4℃ 避光
试剂(E): β-半乳糖苷酶染色液C
100ml
4℃ 避光
使用说明书
1份
操作步骤(仅供参考)：
(一)贴壁细胞染色：
1、对于6孔板中培养的细胞，吸除细胞培养液，用PBS或HBSS洗涤1次，加入β-半乳糖苷酶染色固定液，室温固定。对于其它类型的培养板，固定液及后续溶液的用量参照此比例进行操作。
2、吸除细胞固定液，用PBS或HBSS洗涤细胞。
3、吸除PBS或HBSS，每孔加入染色工作液。使用聚丙烯(polypropylene)容器，不能使用聚苯乙烯(polystyrene)容器配制染色工作液。染色工作液的配制方法参考表1。
表1：染色工作液的配制方法:
β-半乳糖苷酶染色液A
10μl
β-半乳糖苷酶染色液B
10μl
β-半乳糖苷酶染色液C
930μl
X-Gal溶液
50μl
4、37℃孵育过夜，可以用parafilm或保鲜膜封住6孔板防止蒸发。注意：37℃孵育不能在二氧化碳培养箱中进行。
5、普通光学显微镜下观察。如不能及时观察计数，可以去除染色工作液，加入PBS，4℃可以保存数天；或者加上封片液封片后，4℃可以保存较长时间。
(二)悬浮细胞染色：
1、，用PBS或HBSS洗涤1次，加入β-半乳糖苷酶染色固定液，室温固定。固定时可以在摇床上缓慢摇动，以避免细胞结成团块。
2、离心，吸除细胞固定液，用PBS或HBSS洗涤细胞。
3、离心，吸除PBS或HBSS，每管加入染色工作液。染色工作液的配制方法参考表1。
4、37℃孵育过夜。注意：37℃孵育不能在