细胞工程课件：第七章 动物细胞工程1.ppt

文档介绍：动物细胞工程
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内容介绍
一般概述
相关概念
细胞培养准备与操作要点（灭菌、营养、保存）
动物细胞培养方法
动物细胞工程应用
第一节 概述
动物细胞工程是以动物细胞培养技术为主要手段，对动物细胞在离体条件下的细胞形态、结构、生理功能进行研究，在此基础上，采用工程技术手段对细胞的遗传或生理特性进行改造，以获得有价值的细胞产物、器官或个体的生物技术。
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动物细胞工程主要包括：
动物细胞培养
细胞杂交（融合）技术
胚胎培养
细胞核移植
干细胞培养等。
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一、体外培养技术的产生与发展
19世纪后期，胚胎学的发展极为迅速，人们在研究胚胎学时，将一些活的组织放在体外进行观察，从而拉开了培养技术的序幕。
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●1859年，法国解剖学家Vulpain将蛙尾组织在水中培养，观察到了生长与分化现象。
● 1885年，德国人Roux用温生理盐水在体外培养鸡胚组织并使之存活了数天，被认为是组织培养的萌芽。他首次提出了组织培养的概念。
● 1897年，Loeb首次在含有血凝块的试管中培养兔的甲状腺、卵巢、肾脏等，发现这些器官在3天内仍保持正常的组织学结构。他的工作被认为是器官培养的最早尝试。
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● 1907年，实验胚胎学家Harrison（哈里森）为了研究神经突起的起源问题而进行了一项著名的实验：在无菌条件下将蛙胚神经组织接种在蛙的淋巴液中，放在一快盖玻片上，然后将盖玻片翻转并密封在一张凹玻片上，因而创建了盖片悬滴培养法。
● Harrison采用该方法将神经组织培养了数周，并观察到神经突起的生长。这项工作标志着体外培养技术的创立。
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● 1912年，外科医生Carrel（卡勒尔）将外科手术的无菌操作观念带入体外培养技术，并连续培养鸡胚心肌组织长达数年。无菌观念已经成为体外培养的最重要理念。
● Carrel的第二个重要贡献是将组织包埋技术、营养供应和细胞传代技术引入体外培养实验，使Harrison的盖片悬滴培养法更加完善。
● 1923年，Carrel又设计出卡氏瓶培养法，进一步扩大了组织的培养空间，卡氏瓶已成为体外培养的重要器皿。
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● 1925年，Maximow又把Harrison的悬滴培养法改良为双盖片培养, 因而极大地方便了培养液的更换，大大降低了污染的机会。双盖片培养在体外培养的历史上发挥了重要作用，至今仍有不少学者采用这种方法。
● 1926年，Strangewags设计了试管培养法，并改良了器官培养的营养供应方式，开始以血浆和胚胎提取液混合物代替单纯的血凝块。
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● 1933年，Go Gey创立了旋转管培养法，并以此建立了许多细胞系。如来源于人的肿瘤组织的Hela细胞系。
● 1949年，Polge等人发现甘油能够用于保护低温下储藏的细胞。同年，Hanks等提出了Hanks平衡盐溶液。