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菌种鉴定标准操作规程.doc

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菌种鉴定标准操作规程.doc

上传人:2286107238 2021/7/19 文件大小:59 KB

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菌种鉴定标准操作规程.doc

文档介绍

文档介绍:菌种鉴定标准操作规程
目的:建立菌种鉴定标准操作规程
X围:适用于******鉴定标准操作
职责:
内容:
1整体操作步骤
、分离待鉴定菌
用接种环挑取待鉴定菌落或少许含菌溶液到相应的培养基上(如TSA),划线分离,以出现微生物单菌落为止。
,进行革兰染色、镜检,以确定待鉴定菌的革兰属性。
,则先进行发酵实验。如发酵实验结果为阴性,则选用API20NE试剂条进行鉴定;如发酵实验结果为阳性,则在经过细胞色素氧化酶实验后选用API20E试剂条进行鉴定。
,则先进行过氧化氢酶实验。如实验结果为阴性则选用API Strep试剂条进行鉴定,如实验结果为阳性则选用API Staph试剂条进行鉴定。
,则选用API 50CHB试剂条进行鉴定;否则,根据运动性实验和过氧化氢酶实验结果选用API Coryne或其他试剂条进行鉴定。
,根据不同的API试剂条的标准操作规程准备接种物,进行接种、培养等操作并将结果形成数码,用API鉴定软件鉴定或查询待检菌的名称均可。鉴定结果应记录,必要时,给出相应解释。
2革兰氏染色


甲液:结晶紫
95%的酒精 20ml
乙液:草酸铵
水 80ml
将甲液和乙液混合均匀,静置48h使用,置密闭棕色瓶中储存。


碘化钾
水 300ml
配制时先用3~5ml水将碘化钾溶解,再加入碘,用力摇匀,使之全部溶解后,再加水稀释至300ml,摇匀,分装在棕色瓶中储存。
:
碱性品红
石碳酸
95%乙醇
配制时用乙醇溶解碱性品红,然后加入石碳酸溶液,使用时加水稀释至100ml,摇匀。
:
:用接种环挑取液体培养物中菌体在载玻片上涂成薄层,固体培养物则先在载玻片上滴一滴蒸馏水或生理盐水,用接种环挑取少量菌体在载玻片上涂成薄层。
:涂片自然干燥或在酒精灯火焰上方微热烘干,并在火焰上通过2~3次,以固定涂片。
:在已固定的标本上滴加结晶紫溶液数滴,使染色液覆盖整个涂片标本,
染色1分钟。
:斜置玻片使很细水流的纯化水从染色标本的上端流下,勿使水流直接冲刷涂片处,直至洗下的