文档介绍：不同冲洗液残余药对粪肠球菌生物膜的影响课题来源:广东省科高等学校人才引进科研资助项目学位申请人杨柳青导师姓名吴补领教授专业称口腔医学培养类型专业型层次硕士在学第一临床学院年南方医科大学级硕士学位论文所院月日
不同冲洗液残余药对粪肠球菌生物膜的影响硕士研究生:杨柳青指导教师:吴补领教授摘要研究目的研究背景在根管治疗失败及难治性根尖周炎中扮演着重要的角色。根管系统解剖结构复杂,存在机械预备与化学预备无法到达的部位,要完全清除根管系统内的细菌现今多用浸泡方法构建粪肠球菌感染模型,基于此模型的局限性,未能用激光共聚焦扫描显微镜等较快捷直观的方法,研究根管冲洗液残余对牙本质小管内粪肠球菌为革兰阳性兼性厌氧菌,它是再感染根管中检出率最高的细菌,是不可能的。因此为防止根管再感染的发生,抑制根管内粪肠球菌生物膜再形成,维持根管系统内粪肠球菌数量低于致病量尤其重要。目前有关冲洗液性能的研究多集中于冲洗液杀菌性能的研究,有关冲洗液残余抗菌活性的研究较少。粪肠球菌的抑制能力。近年有学者提出用离心方法构建牙本质感染模型,此方法建立的感染模型进入牙本质内的细菌更多,用于评价冲洗液灭菌性能结果更可靠。结合新的感染模型可更准确评价冲洗液残抑制粪肠球菌能力。本课题通过激光共聚焦扫描显微镜察各冲洗液处理牙本质样本后,颈砻娌辛舫逑匆憾苑喑η蚓锬ば成的影响。选择出冢种葡妇锬ば纬尚Ч詈玫母艹逑匆海缓用离心的方法,建立粪肠球菌感染模型,激光共聚焦扫描显微镜观察根管冲洗硕士学位论文
材料和方法液处理此感染模型笱辣局市」苤蟹喑η蚓罹榭觥4友辣局时砻与牙本质小管,两方面观察根管冲洗液抑制细菌生物膜形成情况,评价其残余抗菌活性,为临床选择控制粪肠球菌感染药物提供实验依据。煌逑匆翰杏嘁┒匝辣局时砻娣喑η蚓锬ば纬捎跋粪肠球菌复苏、厌氧培养与细菌鉴定,绘制粪肠球菌预备好的粪肠球菌细菌悬液,厌氧培养胄姆ü菇ㄑ辣局士榉喑η蚓腥灸P本质样本厚度,为的方法是否能使液体进入牙本质小管,、%柠檬酸溶液和ヂ燃憾ㄈ芤褐婧蠼疽迫装逯校别注入璍疍荧光染色后激光共聚焦显微镜观察细菌生物膜形成情况,倍水镜观察样本,每个样本随机抽取銮蛴赡谙蛲馍杌袢、轴图像。∪亟ㄍ计珺甃软件统计三维重组图像活菌体积,.硎荩髯樯锬す鄄庵副昙浣兴婊区组单因素方差分析.,芯两比较。获取每组平均活菌体积与阴性对照组平均活菌体积相比计算每组冲洗液平均抑制细菌生物膜形成比率。选择因正畸拔除的健康前磨牙颗,于釉牙骨质界下截取ぴ仓牙本质块,钻扩大根管,纵向劈开,克ド爸饺コ拦侵剩⒌髡低速球钻调整样本宽度,使其与超滤离心管大小一致。最后制备个大小,半圆柱状牙本质块样本,去除牙本质块表面玷污层,随机抽取鲅镜缇倒鄄扃栉鄄闳コ榭觥H范ㄧ栉鄄闳コ干净后,样本置于超滤离心管中,树脂封闭样本与管壁间隙。为检验定速离心摘要.
/染色后,激光共聚焦扫描显微镜观察样本牙本质内细菌清除情况。结果怖胄牧酱危诿看卫胄闹芯コ龅慕峋ё先芤海⒓尤胄孪式峋ё先液。在另外鲅辣局士檠局屑尤虢峋ё先芤壕仓9鄄炖胄姆ㄊ欠衲培养基后顺次定速离心;两组分别随机抽取一半样本置于扫描电镜下观察,另逑匆翰杏嘁┝慷员局市」苣诜喑η蚓さ挠跋选择因正畸拔除的健康前磨牙牛瓷鲜龇椒ㄖ票秆辣局士檠尽9仓笮“朐仓囱辣局士檠荆尤敕喑η蚓海按上述离心方法离心。将预备好的样本随机分成四组:取銮蚬鄄臁JO碌檠局糜谘嵫蹙嘌渲校嘌染料进入牙本质小管中,随机抽取鲈け负玫难辣局士檠荆尤虢峋ё先液后,按以下离心速度顺次离心看卫胄使染色液透过牙本质块。确定定速离心的方法有效后,随机抽取鲈け负玫样本,加入粪肠球菌悬液,按上述离心法离心,吖啶橙染色液染色后倒置荧光显微镜观察。确定模型建立成功后将剩下的个样本随机分成两组:榧尤粪肠球菌菌液后,按上述方法顺次定速离心;槲?瞻锥哉兆榧尤隑液体一半样本经/荧光染色后,激光共聚焦扫描显微镜观察。备例ゴ温人崮迫芤组、ゴ温人崮迫芤椋%氯己定溶液椤样本分别经ゴ温人崮迫芤海%氯己定溶液处理。抽取檠荆/荧光染色后激光共聚焦扫描显微镜观察,每个样本随机抽笕〕∪亟ㄍ计珺甃软件统计三维重组图像活菌体积计算每组样本活菌比例,处理数据。谙妇で咄枷允荆肓宋榷ㄆ凇8髯槌逑匆憾苑喑η蚓物膜均有不同程度的抑制作用。ヂ燃憾ㄈ芤鹤榛罹钌伲芤种%细菌生物膜形成,次氯酸钠溶液组活菌数多,抑制细菌生物膜形成能力最差硕士学位论文
结论菌液也可以透过牙本质。荧光显微镜结果与激光共聚焦扫描显微镜观察结质小管内,牙本质小管内见大量细菌浸润,大部分细菌形态规则,阴性对照组未见细菌浸润,牙本质小管通畅,结构清晰,%氯己定残余药液在本质