文档介绍：第四次实验课内容
1、细菌代谢产物检查（示教）
2、肠道杆菌在选择鉴别培养基的生长情况
（示教）
SS平板、双糖铁培养基
3、肥达试验（结果示教）
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实验一细菌代谢产物检查
细菌具有不同的代谢酶系统，因此对营养物质的利用与分解能力也各不相同，可形成不同的中间代谢产物与终末代谢产物。根据细菌的代谢能力及其产物不同鉴别细菌，称为细菌的生化反应。本实验通过介绍常用生化反应的经典试验方法，以了解细菌生化反应的机制与实验原理。
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原理：
染色镜检
普通琼脂平板中菌落的形态
不能鉴别
能够鉴别
实验一细菌代谢产物检查
细菌代谢产物
分解代谢产物
合成代谢产物
生化反应
?
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细菌菌落的色素观察
金黄色葡萄球菌：产生只局限于菌落的脂溶性金黄色色素。
铜绿假单胞菌：产生带荧光的水溶性色素，该色素可扩散至菌落周围，使培养基呈亮绿色。
金黄色葡萄球菌
铜绿假单胞菌
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细菌菌落的溶血现象观察
乙型溶血性链球菌:透明的无色溶血环。
5
一、糖发酵试验
。
。
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基本原理
糖发酵试验是最常用的生化反应，在肠道细菌的鉴定上尤为重要。绝大多数细菌都能利用糖类作为碳源和能源，但是它们在分解糖的能力上有很大的差异，有些细菌能分解某种糖并产酸（如乳酸、醋酸、丙酸等）和气体（如氢、甲烷、二氧化碳等）；有些细菌只产酸不产气。例如大肠杆菌能分解乳糖和葡萄糖产酸并产气；痢疾杆菌能分解葡萄糖产酸不产气，不能分解乳糖；乙型副伤寒杆菌分解葡萄糖产酸产气，不能分解乳糖。
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基本原理
酸的产生可利用指示剂来断定。在配制培养基时预先加入溴甲酚紫[（黄色）-（紫色）]，当发酵产酸时，可使培养基由紫色变为黄色。
气体的产生可由发酵管中倒置的德汉氏小管中有无气泡来证明。
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糖发酵试验：
乳糖
乳酸
乳糖酶
葡萄糖发酵试验：
细菌
葡萄糖
***酸
各种酸类
甲酸
H2 + CO2
脱氢酶
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四、操作步骤
1、编号
用记号笔在各试管上分别标明发酵培养基名称和所接种的菌名。
2、接种
取盛有葡萄糖发酵培养基的试管3支，分别接种大肠杆菌、痢疾杆菌、乙型副伤寒杆菌。另取乳糖发酵培养基试管3支，分别接种这三种细菌。
3．将上述已接种的葡萄糖和乳糖发酵试管和对照管置37℃温室中培养24小时。
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