文档介绍：±垦塑塑墨型查兰堡主婴窒竺兰垡堡苎一一 AST ALT PPA NCCLS AMI CV SOP LDH MDH NADH }lCL NaOH Nacl DRE NaN3 Km ANOVA BSA 中英文缩略词表 Aspartate aminotransferase Aminotransferase pyridoxal一5一phosphoric acid mittee for clinical laboratory standards International federation of clinical chemistry and laboratory medicine acute myocardial infarction cofficient of variation standard operat on procedure lactate dehydrogenase malate dehydrogenase B—Nicotinamide adenine dinucleotide hydrochloric acid sodium hydroxide solution sodium chlori de Diluent for reagent enzymes Sodium azide Michaelis constant analysi s of variance bovine serum albumin 3 天门冬氨酸氨基转移酶丙氨酸氨酸氨基转移酶 PPA 美国国家临床实验室标准化委员会国际临床化学与检验医学联合会急性心肌梗死变异系数标准操作程序乳酸脱氢酶苹果酸脱氢酶还原型烟酰***腺嘌呤二核苷酸,还原型辅酶I 盐酸氢氧化钠***化钠酶试剂稀释液叠氮钠米氏常数方差分析小牛血清白蛋白中国协和医科大学硕士研究生学位论文天门冬氨酸氨基转移酶(AsT)和丙氨酸氨基转移酶(Au’) 37℃参考测定程序的建立及其临床应用摘要背景和目的测定血清或其他组织中一些酶的水平对很多疾病的诊断、预防及病情的监测具有重要意义。酶的测定方法目自日有两种,一种利用免疫办法测定酶的质量,另种用生化方法测定酶的催化活性。测定酶的催化活性是最为常用方法,它具有迅速、灵敏、成本低等特点。但由于酶的催化活性小仅决定于酶的含量,还受多种因素的影响,如所用底物的性质及浓度、反应介质的PH、温度、离子强度、激活或抑制因子等,因此对同一酶测定存在多种参考范围,各实验室问的结果缺乏可比性,甚至有时会引起临床上的误诊。国内各f临床实验室间测定酶活性结果的差异较大,明显高于一般小分子化合物的测定结果。为了提高酶测定实验的准确性和精密度,使酶测定结果在方法上,实验室『白J有可比性,消除参考范围的多重混乱,以利于临床席用,开展酶测定的标准化工作势在必行。近20年来,国内外主要从三个方面丌展了酶测定的标准化活动:一是提出使用参考测定程序(参考方法);二足用参考方法定值的酶参考物去校准常规方法;三是建立参考实验室9目络。ALT和AST是临床化验中常规项目,测定结果的准确与否对i临床诊断有很大影响。推荐的AST和ALT(37℃)参考测定稗序来建立这两种酶活性(37℃)测定的参考方法,并探讨在常规试剂中加入磷酸毗哆醛(PPA)的测定方法的可行性。研究对象与方法 :分为四组:肝脏病组363例:急性肝炎77例(男39女38)、’|曼性肝炎118例(男60女58)、肝硬化87例(男45女42)、肝癌78例(男40女38);心脏病组180例:急性心肌梗死(AMI)102例(男50女52)、心绞痛78例(男40女38); 透析组78例(男40女38)及其表观健康人群22:{例(男12()女1()3)。透析组78例(男40女38)及其表观健康人群223例(男120女103)。 4 中国协和医科大学硕十研究生学位论文 (37℃)加PPA的参考方法; 采用罗氏公司加与不加PPA的常规试剂测定研究对象的血标本,同时用新鲜血清比较加PPA的常规方法和参考方法的结果;Ls文件进行方法学评价。结果我室初步建立的AsT和ALT(37℃)标准操作程序(sOP)的相应方法学参数,如下:AST和ALT的检测限均为1 U/L:—%、 %,线性范围均为卜300 u/L。AsT测定结果偏差超过5%的干扰物浓度分别为游离胆红素15mg/dl:结合胆红素12mg/d1:血红蛋白100mg/dl:ALT测定结果偏差超过 5%的干扰物浓度分别为游离胆红素121119/dl:结合胆红素8mg/d1:血红蛋白200 mg/d1: 而甘油三酯在850 mg/dl以下对两种酶的干扰仍然小于5%。本室参考范围AST:男性 10—40u/L;女性7—4