文档介绍:山东农业大学
硕士学位论文
小麦大粒突变体的鉴定和相关cDNA片段的克隆
姓名:许云峰
申请学位级别:硕士
专业:作物遗传育种
指导教师:李斯深
20080618
缩略词说明挝甲叉双丙烯酰胺差异显示反转录聚合酶莫洛尼鼠病毒逆转录酶信使核糖核酸酶英文缩写英文名称猵—猤中文名称丙烯酰胺氨苄青霉素过硫酸铵碱基对互补重蒸水链式反应焦碳酸二乙酯脱氧核糖核酸溴化乙锭乙二胺四乙酸甲基磺酸乙酯表达序列标签异丙基一狣一硫代半乳糖苷培养基聚丙烯酰胺凝胶电泳聚合酶链式反应核糖核酸酶抑制剂核糖体核糖核酸十二烷基磺酸钠甆—猙—.狿
%秭缓冲液一猵简单序列重复/硼酸/
导师签名:绉霉期:幽./莎论文作者签名:盔丞晕关于学位论文原创性和使用授权的声明本人所呈交的学位论文,是在导师指导下,独立进行科学研究所取得的成果。对在论文研究期间给予指导、帮助和做出重要贡献的个人或集体,均在文中明确说明。本声明的法律责任由本人承担。本人完全了解山东农业大学有关保留和使用学位论文的规定,同意学校保留和按要求向国家有关部门或机构送交论文纸质本和电子版,允许论文被查阅和借阅。本人授权山东农业大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索,可以采用影印、缩印或其他复制手段保存论文和汇编本学位论文。保密论文在解密后应遵守此规定。日
摘要传统的化学诱变方法,能诱发产生高密度的点突变,获得遗传背景相品种“烟农”为对象,用匝膛闹肿咏杏毡浯恚秆突变体,以构建变异类型丰富的小麦突变体库、创造小麦新种质,为小麦系均有复合性状突变出现,将其分为嗤槐浔硇停个大粒、高秆突变∪「吒选⒋罅M槐涮胙膛咏唬菇ㄒ糯ǚ治鋈訣引物对受体烟农和鯩槐湎到辛个引物对扩增结果的差异表现为条带的有无:鲆锒员硐治@┰龀龀关键词:小麦;煌槐涮澹籈;;似的突变体。不仅能够解决小麦育种中种质资源匮乏的问题,也为相关基因的精细定位、克隆以及基因功能的分析等提供了研究平台。近年来,随着分子生物学研究的不断深入和生物技术的迅猛发展,利用基因工程技术结合传统育种方法来培育优良作物品种并从基因表达水平上分析特定基因及其相关基因己成为许多科研工作者研究的热点之一。本研究选用小麦功能基因研究和小麦遗传改良提供基础材料。齅秆『蚆ǎ玫酱罅吭诰ジ诵宰础⒁镀宰础穗部和籽粒性状以及结实性等方面发生变异的突变体,构建了变异性状丰富的小麦突变群体。获得个农艺性状发生明显变异且表现一致的突变株系,其中,籽粒大小和株高两个性状的变异幅度最大。个突变系;霭氚ǜ淹槐湎担个高秆、多蘖突变系。体。通过对杂种代和代群体的表型分析发现,高秆、高千粒重和宽粒这三个性状受显性单基因控制。分析,共有个引物对在受体和突变系间能扩增出差异条带。其中度不同的差异条带。对突变体中的一个扩增片段进行克隆测序,发现其序列与原蛄邢嗤砻鞲闷稳肥滴D勘昀┰銎巍胢钜煜允痉椒ǘ匝膛捌浯罅M槐涮逶谧B妓缴进行分析,获得了一部分在二者之间差异表达的片段。对这些片段进行克隆、测序和生物信息学分析,发现部分片段与已知序列有很高的同源性。山东农业大学硕上学位论文
躵。,琧,,,.瑆瑀鵱—’..·,、
琣,篧;,;;
食钛┑龋。在我国,小麦是仅次于水稻的第二大粮食作物。发目前,我国小麦育种中普遍存在的问题是种质资源匮乏,改变这种现状最基本、有效的途径之一是应用诱变育种等常规育种和分子育种相结合的方法,即人工诱导产生突变,从中筛选有益性状突变体,经多代筛选和粒重是小麦、水稻等谷物作物产量的直接构成因素,在品种改良中具都是微效的,其中有主效基因的存在。最近,蚐V芰记⒘趺魑谒局蟹⑾至长受一对主效基因控制,并对其进行了精细定位分析,获得了具有生物功.,取5巧形醇孕小麦是世界上分布范围最广、种植面积最大、产量最高、贸易额最多的粮食作物之一,世界上约有%的人以小麦为主展小麦生产在我国粮食生产中具有举足轻重的地位,对人民生活水平有着重大影响。鉴定,培育高产、优质及综合性状优良的小麦新种质。随着基因组研究的不断推进,以功能鉴定为主的反向遗传学正逐步取代以表型筛选为主的正向遗传学,成为功能基因组学研究的主要方法.,4车幕в毡浞椒ǎ苡辗⒉呙芏鹊牡阃变,获得遗传背景相似的突变体,不仅便于农作物诱变育种的实际所需,也有助于基因的精细定位和了解蛋白质的功能,为高等生物遗传机理的研究和作物改良提供了一个良好的途径有重要作用。粒重与籽粒的大小和密度有关,被认为是经典的数量性状,受多基因或微效基因的控制。然而,并非所有控制粒重的基因的遗传效应分别克隆了控制水稻米粒长度、粒重的主效涂刂扑玖?怼⒘重的主效能的候选基因。在小麦中,定位了许多基因和包括粒重的.,;并分离了一