文档介绍：资助项目：
国家自然科学基金资助项目（对乙酰氨基酚联合乙酰半胱氨酸对仔
猪免疫应激性炎症的协同抑制作用及其调控机制，30972213，2010-2012
年）
摘 要
由疫苗接种或病原体感染引起的猪免疫应激在养猪生产中较为普遍，给养猪业带
来的危害极大。脂多糖（LPS）是具代表性的免疫应激诱导剂。本项目组在前期的工
作中已经采用 LPS 诱导的方法，成功地建立了仔猪的免疫应激性炎症模型，研究并
发现对乙酰氨基酚和乙酰半胱氨酸单用或合用都能通过抑制 TLR4-NF-κB 信号通路
从而缓解仔猪的免疫应激性炎症。本试验在此工作基础上进一步研究了对乙酰氨基酚
和乙酰半胱氨酸缓解仔猪的免疫应激性炎症的分子机制，以期完善其相关分子机制理
论。炎性小体（inflammasome）介导的半胱天冬酶-1(Caspase-1)信号通路能够促进炎
性细胞因子 IL-1β 和 IL-18 的成熟与分泌，在机体免疫应激性应答中起着重要作用。
本试验通过一系列体内外试验，研究了对乙酰氨基酚联合乙酰半胱氨酸对免疫应激仔
猪炎性小体信号通路的影响。
体外试验：采用脂多糖诱导的方法，建立了仔猪外周血单核细胞的免疫应激模型。
通过测定细胞培养上清液中 IL-1β、IL-18、TNF-α 的含量以及细胞裂解液中 Cleaved
Caspase-1 的含量，研究对乙酰氨基酚和乙酰半胱氨酸单用及合用后对仔猪单核细胞
炎性小体信号通路激活的影响。方法：将分离后培养的仔猪外周血单核细胞分别设空
白对照组、LPS 造模组、对乙酰氨基酚组（浓度为 、 和 1 mM）、乙酰半胱氨
酸组（浓度为 、 和 1 mM）与联合用药组（两药浓度均为 、 和 1mM
组合），进行药物预处理 1h 后，再加入终浓度为 1μg/mL 的 LPS，继续培养 10、16
和 20h 后，采用 ELISA 法测定细胞培养上清液中 IL-1β、IL-18 和 TNF-α 的含量；采
用 Western blot 方法测定 LPS 刺激 10h 后的单核细胞中 Cleaved Casapse-1 的含量；采
用 RT-PCR 方法测定 LPS 刺激 3h 后的单核细胞中 IL-1β 和 IL-18 的 mRNA 表达量。
结果：①脂多糖诱导 10h 后，细胞培养液中 IL-1β、IL-18 和 TNF-α 均极显著上升
（P<）。乙酰半胱氨酸浓度在 、 时能极显著地（P<）增强对乙酰
氨基酚（-1mM）对 IL-1β、IL-18 和 TNF-α 分泌的抑制效果，浓度在 1mM 时能
极显著地（P<）增强对乙酰氨基酚（1mM）对 IL-18 及 TNF-α 分泌的抑制效果，
显著地（P<）增强对乙酰氨基酚（1mM）对 IL-1β 分泌的抑制效果；脂多糖诱导
16h 后，细胞培养液中 IL-1β、IL-18 和 TNF-α 均极显著上升（P<）。乙酰半胱氨
酸浓度在 时能极显著地（P<）增强对乙酰氨基酚（）对 IL-1β
和 TNF-α 分泌的抑制效果，显著地（P<）增强对乙酰氨基酚（）对 IL-18
分泌的抑制效果。乙酰半胱氨酸浓度在 、1mM 时能极显著地（P<）增强对乙
酰氨基酚（-1mM）对 IL-1β、IL-18 和 TNF-α 分泌的抑制效果；脂多糖诱导 20h
后，细胞培养液中 IL-1β、IL-18 和 TNF-α 均极显著上升（P<）。乙酰半胱氨酸浓
度在 以上时能极显著地（P<）增强对乙酰氨基酚（-1mM）对 IL-1β、
IL-18 和 TNF-α 分