文档介绍：酶联免疫吸附试验的影响因素检验科实验过程中的影响因素终止与读数终止与读数结果的判读结果的判读试剂试剂加样加样温育温育样本样本洗板洗板显色显色一、标本排泄物排泄物血清血清唾液唾液尿液、粪便尿液、粪便分泌物分泌物体液体液血清标本脂血标本脂血标本溶血标本溶血标本标本的保存标本的保存标本的离心标本的离心采血试管采血试管采血试管?? 1. 使用非抗凝标本(血清); ?肝素抗凝血浆会增加 OD 值;EDTA 、酶抑制剂(如 NaN3) 可抑制 ELISA 检测系统中辣根过氧化物酶活性;? 2. 最好使用一次性玻璃试管或真空采血管. ?标本采集后,应先将标本 37 °放置? 30-60 分钟后采用 3000r ? /min 离心 15-20 分钟,取?上清液加样。标本的离心标本的离心??强行离心分离血清,会使血清中仍残留部分纤维蛋白原,在 ELISA 测定过程中可以形成肉眼可见的纤维蛋白块或附着在酶标板孔壁内使酶标记物不易洗掉,易造成假阳(阴)性结果。标本的保存? 1. 一周 ---- 2 ~4℃保存; ? 2. 超过一周 ---- 建议-20 ℃保存。? 3. 冰冻血清融解后,蛋白质会出现局部浓?缩而分布不均,加样前应充分混匀。??标本的保存?? 4. 混浊或有沉淀的血清标本应先离心或?过滤,澄清后再检测。? 5. 作多次检测,宜少量分装冰存; ? 6. 血清标本宜在新鲜时检测尽量避免细?菌污染。?避免细菌污染 A. 如有细菌污染,菌体中可能含有内源性的 HRP 会产生假阳性; B. 细菌的生长,其所分泌的一些酶可能会对抗原抗体等蛋白产生分解作用(如明胶酶等蛋白水解酶); C. 一些细菌的内源性酶如大肠杆菌的β-半乳糖苷酶本身会对用相应酶作标记的测定方法产生非特异性干扰。