15 免疫标记技术.ppt

文档介绍：第十五章免疫标记技术
岳华
标记抗体技术是在抗体球蛋白分子上,连接某一个特定的、容易检测的分子或原子(标记物),利用标记抗体能与相应抗原结合的特性,通过标记物的检测,从而确定抗原的存在部位。标记抗体技术目前广泛应用的主要有荧光抗体、酶标记抗体和同位素标记抗体等。前二者主要用于抗原定位,而后者不仅可用于定性、定量,还可用于定位。此外尚有铁蛋白标记抗体,主要用于免疫电镜的技术,在亚细胞水平上进行抗原定位。
一、荧光抗体技术(Fluorescent antibody technique)
将荧光染料连接在提纯的抗体球蛋白分子上,这种用荧光染料标记的抗体,就叫荧光抗体。一种物质受到短波光线(如紫外线、蓝紫光)激发后,能放出波长比激发光长的可见光,此种光称为荧光染料,抗体经过荧光染料标记后,并不影响其与抗原结合的能力和特异性。因此,当荧光抗体与相应的抗原结合时,就形成带有荧光性的抗原抗体复合物,从而可在荧光显微镜下检出。
(一)直接法将提纯的抗体球蛋白(主要为IgG)与FITC结合制成荧光抗体。