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伪狂犬病病毒gd基因核酸疫苗及vp22免疫增强效应研究.pdf

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文档介绍

文档介绍:西弗虫学硕士学位论文增强效应的研究伪狂犬病病毒基因核酸疫苗及免疫论文作者:陈懿指导教师:聂奎淌研究方向:兽医生物技术提交论文日期:年论文答辩日期:年日学位授予单位:西南大学中国·重庆年学科专业:预防兽医学单位代码笪稹祆学号
摘要增的基因和基因基因片段克隆到载体,构建质粒、结果表明,扩增的基因片段为,基因片段琯蚱挝使用核酸内切酶虴,酶切携带目基因片段的、霸原核表达质粒和—分别转化∞赴琁盏迹琒—将以T靥澹菇ǖ亩驶蛘婧吮泶镏柿·和上、⒐菇ㄔ吮泶镏柿伪狂犬病是当今危害养猪业的最重要传染病之一,虽然~些国家实施了根除计划,但在绝大多数国家尤其是发展中国家,该病仍然频繁发生,造成的经济损失巨大,严重制约着这些国家和地区养殖业的发展。免疫接种仍是目前控制和预防该病的主要手段。传统的猪伪狂犬病疫苗对控制疾病的发生和流行发挥了巨大作用,但无论是灭活疫苗还是弱毒疫苗均不同程度的存在免疫效果不佳或毒力返强等缺陷。研制更安全、高效、廉价的新型疫苗一直是伪狂犬病研究的重要方向。本研究在克隆、表达猪伪狂犬病病毒琍魽株的主要免疫原性基因的基础上,构建了这一基因的真核表达质粒并作为核酸疫苗,通过肌肉注射的方式免疫试验动物,检测了动物产生的免疫应答水平以及对病毒攻击的保护能力,结果证实这些核酸疫苗可以有效激活试验动物产生全面的免疫应答反应。同时还研究证明伪狂犬病毒对猪伪狂犬病核酸疫苗具有免疫增效作用。主要研究内容如下:甈株基因、基因的克隆分别以重组质粒和甐D0澹杓埔铮ü齈扩增,在基因的坏悖赩虻纳稀⑾掠我隭蚻坏悖ɡ并将蜕虾2┭巧锕こ坦静庑颉C盖械缬炯ǎ琯基因片段长度约为,基因片段长约琯猇蚱纬ぴ翰庑经对比发现扩增的基因、蛴隚泄ú嫉腜的基因和基因标准序列一致,在┰龉讨忻挥蟹⑸罨槐洹泶镏柿5墓菇、约罢婧吮泶镏柿猇T吮泶镏柿!真核表达质粒分别酶切电泳后,,可以表明目的基因已经插入到表达载体的多克隆位点处。甮蛟诖蟪Ω司械母咝П泶结果显示:能够在大肠杆菌中表达出约的蛋白,芄辉诖蟪Ω司中表达出约的融合蛋白,结果表明以上两种原核表达蛋白具有良好的反应原性。;ぃ癡鞍酌庖咴銮孔饔.,以痯庖連痗小鼠,间隔天增强免疫一次。二免芎蟛用腜株强毒攻击,庖咦楹蚿,免疫组疫苗对小鼠的保护率分别为ズァ西南大学硕士学位论文
庖吲手关键谰:,与非融合表达质粒甮斜冉希浣覧检测发现与融合表达能显著增强特异性健通过对小鼠外周蠧馨拖赴俜趾糠治龇⑾∈
,鑫肺飈西南大学硕士学位论文’琫斜,。,。琫:,·蜀‰甌摊,甋、琹、—、—。,瓻甤,...琲瓵琱瓵琫,甮琩。琣瑃.、—,,...
瓵—:西南大学硕士学位论义甈’.瓵%..籫;瓵琣/,琣甿..,—,;籈籘
:重鏖立坠江匡堑坐盘道耍墨——邮编学位论文作者签名:你自孽独创性声明学位论文版权使用授权书学位论文作者:伤采壹学位论文题目:丛蕉走痘痘盔┗蛏盟嵋咻尕里免疫擅签字日期:ふ寄暾荚日签字日期:£叻暾荚翵日工作单位:。据我所知,除了文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果,也不包含为获得西南大学或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。签字日期:年日本学位论文作者完全了解西南大学有关保留、使用学位论文的规定,有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘,允许论文被查阅和借阅。本人授权西南大学研究生院可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索,可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。C艿难宦畚脑诮饷芎笫视帽臼谌ㄊ椋韭畚模嚎诓槐C埽口保密期限至年月止导师签名:学位论文作者毕业后去向:
营激酶晒。虳结合缀自《,嗑垧孙和主要表轰蛋囱等慧黼,第一章文献综述⑽泵腿《径驶蜓芯拷蜃榻峁益麒鞍椎闹饕C乩嗉肮Ψ伪强灾病琍楚由疱疹病毒辩、猪疱疹病毒时N笨袢巢《琍鸬亩嘀旨倚蠛鸵吧锏囊恢指叨冉哟バ浴⒓毙源静以发热、奄痒吃ド及脑脊鼹炎为主要癌状。最晕发现于美灏,最来出匈矛剥科学家首先分离出病毒。猪是该瘸原的传播者和自然宿主”’。懒纪中期,在束欧及巴尔干半岛的国家流行较广,猪被感染后其症状比较温和;但世纪~年代以来,由于慷局甑某隼恚沓”⒃コ凼肯灾鱿福⑾帜涞脑尘筛恤

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