文档介绍：猪伪狂犬病病毒基因缺失株的构建及免疫效力研究扬州大学兽医学院研究生:胡艳芬专业:预防兽医学导师:彭大新教授陈素娟副教授刘秀梵教授帐∏嗬豆こ蹋崭咝S攀蒲Э平ㄉ韫こ年
猪伪狂犬病病毒基因缺失株的构建及免疫效力研究摘要笨袢〔《緂蛉笔е甑墓菇ḿ捌渖ぬ匦匝芯笔е阹//。和甮C庖咝Яρ芯陈素娟副教授刘秀梵教授伪狂犬病病毒琍梢鸲嘀旨倚蠹耙吧锍鱿忠云嫜骷澳脊髓炎等为特征的急性传染病。目前疫苗接种是控制úサ闹饕7椒ǎ芯空呙钦力研发保护效率更好的基因工程疫苗。#疶/’和’,并对两株缺失株的生长特性及免疫效力作了初步研究,为猪伪狂犬病疫苗及病毒活载体疫苗的进一步研制提供了候选疫苗株。用昊蜃镈扩增出基因两侧的序列作为左右重组臂,以增强型绿色荧光蛋白为筛选标记,构建带有两个同向位点的瓽转移载体,并与双缺失株疶坏幕蜃镈共转染细胞。琼脂覆盖后,挑荧光斑收取病毒,并以有限稀释法纯化获得带有的重组病毒#疶/‘/。采用刈槊盖贸鼸邢尴∈头ù炕痝笔е阹甮疶‘。用相同的方法将构建成缺失株甮6云浠蜃镻产物进行序列分析,结果显示.’/。/。或甮趃蚰诓咳笔未笮∥与亲本株./’相比:在细胞上,.。/痝脑鲋乘俣惹捌诮为缓慢,但其产生的病毒效价不受影响;在赴希。/‘的增殖速度明显减慢,产生的病毒效价比亲本株降低了约倍。说明进一步缺失基因对病毒的体外增殖有一定的影响,但在不同的细胞系上,,胡艳芬:猪伪狂犬病病毒基因缺失株的构建及免疫效力研究研究生:胡艳芬导师:彭大新教授一致。而且产生的病毒效价也显著受影响,比亲本株降低约丁K得鱣虻娜笔г谝欢程度上降低了病毒的体外增殖能力。的测定结果显示,与野生株甁相比,、、基因的缺失使突变株。
关键词:伪狂犬病病毒;基因;复制;毒力;缺失株的毒力显著降低,但./‘/。和亲本株.。/’的均大于比较采用昝庖吖ザ竞笮∈蟮拇婊盥士芍#阂淮蚊庖遰//。组的保护率高于./。组,两次免疫组保护率相似;/。/一组和。的保护率略高于;体上免疫保护效力与免疫剂量呈正相关;两次免疫的保护率高于一次免疫,其中组两种免疫程序所诱导的保护率相似。由血清抗体检测结果可知,与./’相比.‘//。可诱导小鼠产生较高的抗体水平,,诱导产生的抗体水平稍高,,血清抗体水平结果与疫苗的保护率一致。说明这两株基因缺失株均可提供给小鼠有效的免疫保护效力,.。//。株的保护率更高。所以无法比较两株病毒的毒力差别;而..。的毒力比亲本株狟汀K得鱣基因的缺失对病毒的毒力有一定的影响。—/。组的保护率均高于瓸椋总扬州大学硕士学位论文,一
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谢胡艳芬:猪伪狂犬病病毒基因缺失株的构建及免疫效力研究;籿;甀,唬疶痝甴:籫.
目录摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.目录⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.Ⅵ符号说明⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯Ⅶ综述伪狂犬病病毒分子生物学及活载体研究进⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯魑R呙缭靥宓难芯拷埂第一章猪伪狂犬病病毒基因缺失株的构建及其生物学特性的研究⋯⋯.牧稀峁弧第二章重组猪伪狂犬病病毒的免疫效力研究⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.牧稀致邸致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.《咎卣鳌《净蜃椤隤毒力相关的蛋白及其功能研究⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯椒ā致邸参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯椒ā峁参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..全文小结⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..论文发表⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..扬州大学硕士学位论文⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.
业氨苄青霉素细胞病变脱氧核糖核酸三磷酸脱氧核苷酶联免疫吸附试验克/毫克/微克辣根过氧化物酶免疫球蛋异丙基硫代半乳糖苷千道尔顿半数致死量摩尔/升光密度值磷酸盐缓冲液磷酸盐缓冲液/吐温聚合酶链式反应猪。肾传代细胞伪狂犬病毒半