文档介绍：无菌操作技术组员:赵华赵诣陈珩杜宇菲高宝才高瑞钰讲解:高宝才 PPT 制作:杜宇菲高瑞钰资料查找人:赵华赵诣陈珩无菌操作技术无菌:在科学研究和生产实践中使用的微生物必须是单一的纯种或菌株,不能存在杂菌(非目的菌)。无菌操作防止微生物进入机体或物体的方法在微生物操作过程中,除了使用的容器、用具(试管、三角烧瓶、平皿和吸管等)和培养基必须进行严格的灭菌处理外,还要通过一定的技术来保证目的微生物在转移过程中不被环境中的微生物污染,这些技术包括用接种环(针)、吸管、涂棒等工具进行接种、稀释、涂片、计数和划线分离等。实验目的 1. 学****掌握培养基的配制原理,同时通过对几种培养基的配制掌握配制培养基的一般方法和步骤。 2. 了解高压蒸汽灭菌的原理和应用范围,学****高压蒸汽灭菌的操作技术。 3. 证实实验室环境与人体表面存在微生物,体会无菌操作的重要性。实验目的 4. 熟练掌握从固体培养物和液体培养物中转接微生物的无菌操作技术,熟知各种菌种保藏方法,以及各个方法的特点和区别。 5. 学****并掌握微生物的制片和简单染色的基本技术,初步了解细菌的形态特征。巩固显微镜操作技术及无菌操作技术。实验原理 1. 培养基是人工按一定比例配制的供微生物生长繁殖和合成代谢产物所需要的营养物质的混合物。培养基的原材料可分为碳源、氮源、无机盐、生长因素和水。根据微生物的种类和实验目的不同,培养基也有不同的种类和配制方法。实验原理 ,通过加热,使灭菌锅隔套间的水沸腾而产生蒸汽。待水蒸气急剧地将锅内地冷空气从排气阀中驱尽,然后关闭排气阀,继续加热,此时,由于蒸汽不能溢出,而增加了灭菌锅内的压力,从而使沸点增高,得到高于 100 摄氏度的温度。导致菌体蛋白质凝固变性而达到灭菌的目的实验原理 :一种是通过放大微生物个体, 是我们能够看到它们;另一种方法是通过“放大”成子细胞群体(菌落),使我们看到它们的存在,即通过培养的方法使肉眼看不见的单个菌体在固体培养基上,经过生长繁殖形成几百万个菌聚集在一起的肉眼可见的菌落。实验原理 4. 高温对微生物具有致死效应,因此在微生物的转接过程中,一般在火焰旁进行,并用火焰直接灼烧接种环(针、铲),以达到灭菌的目的,但一定要保证其冷却后方可进行转接,以免烫死微生物。如果是转接液体培养物,则用预先已灭菌的玻璃吸管或吸嘴; 如果只取少量而且勿需定量也可用接种环, 视实验目的而定。实验原理 ,还必须通过各种保藏技术使其在一定时间内不死亡,不会被其他微生物污染,不会因发生变异而丢失重要的生物学形状,否则就无法真正保证微生物研究和应用工作的顺利进行。保藏菌种的方法包括传代培养保藏、冷冻保藏和干燥保藏。