文档介绍：LBA4404根癌农杆菌
编号
名称
北京华越洋生物NRR01270
LBA4404根癌农杆菌
基本信息：
名称：LBA4404根癌农杆菌
规格：300ul甘油菌
储存温度：・809
类别：根癌农杆菌
抗性：Rif,Str
培养基：YEB或LB
培养方式： 289,有氧
保存方式： 30%甘油，・809
基因型：Ach5 （rif R） Ti pAL4404 （strepR） Octopine
菌株简介：
LBA4404菌株为Ach5型背景，核基因中含有筛选标签一一利福平抗性基因rif,为了便于转化操作，此菌株携带一无自身转运功能的章鱼碱型
Ti质粒pAL4404,此质粒含有vir基因（vir基因是T-DNA插入植物基因组必需的元件，PAL4404质粒自身的T・DNA转移功能被破坏，但可以帮助
转入的双元载体T-DNA顺利转移）。PAL4404型Ti质粒含有筛选标签:
strep,赋予LBA4404菌株链霉素抗性，适用于菸草、番茄、烟草等植物
的转基因操作。
操作说明：
1，本品包含一份甘油菌，使用本甘油菌时可以不用完全融解，在甘油菌表面薩取少量涂板或进行液体培养即可。也可以完全融解后使用，但随着冻融次数的增加，细菌的活力会逐渐下降。
为保证菌种纯正，避免其它细菌污染，尽量先划半板，然后再挑单克隆菌落进行后续操作。
冷冻管开封：
用浸过75%酒精的脱脂棉严格消毒冷冻管盖。
菌株复溶：
无菌环境中旋开装有复溶液的滴瓶盖，吸取1ml左右复溶液，加入到冷冻管中。轻轻振荡，使冻干菌株溶解呈悬浮状。
菌株复壮：
用无菌吸管吸取菌悬液，转移到复溶液滴瓶中。做好标识，在适宜温度下培
养。细菌在30-35€培养箱中培养24-48h,真菌在23-28°C培养箱中培养24-72h （必要时，可适当延长培养时间）。
菌株传代：
将得到的菌株的新鲜培养物转接到适宜的I古I体培养基及液体培养基中（尽最增大接种量：如用无菌吸管吸収M50M新鲜培养物至固体培养基，边移动边缓慢释放），适宜温度下培养，用以菌株的保藏、传代及制备工作菌株。
注意事项：
1、