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山东大学博士学位论文
重组人生长激素对烧伤大鼠肠粘膜屏障及肠源性感染
影响的研究
中文摘要
目的
严重烧伤、创伤、休克、感染和大手术等多种病理因素,均可导致肠粘膜屏
障功能障碍、肠道菌群生态失调和机体免疫功能受损,使肠道细菌和内毒素不断
移位侵入宿主,诱生肿瘤坏死因子等众多炎性介质释放,继而触发机体
过度的炎症反应、高分解代谢和器官损害。移位的细菌和内毒素及其诱生的炎性
介质又反作用于肠道加重其损伤,促进肠道细菌和内毒素移位而成恶性循环。临
床上肠源性感染不但与早期暴发性脓毒症、持续的高代谢反应和脓毒性休克的发
生、发展密切相关,而且在多器官功能障碍综合征的发病机理中起关
键作用。肠道是外科应激的一个中心器官,进一步探索防治肠源性感染的有效措
施,特别是在严重创伤应激后如何维护或尽快恢复肠道的正常屏障是急需研究的
重要课题。生长激素除具有促进蛋白质合成、加快创伤愈合、改善免疫
功能、降低应激反应等作用外,还能够促进肠粘膜细胞增殖、抑制细胞凋亡、维
护肠粘膜屏障功能。初步研究显示,能够减轻严重创伤应激后肠道细菌内毒
素移位及其并发症,能够改善其预后。然而,针对严重创伤应激后普遍存在的肠
道损伤,以防治肠源性感染为主要目的的关于有效性的研究尚少,而且研究
对象、处理因素各异,甚至出现增加危重病人死亡率的报道。
本研究采用能够引起肠源性感染的烧伤后免疫抑制大鼠模型,分别观察、探
讨重组人生长激素早期大剂量应用对大鼠肠粘膜屏障、肠粘膜细胞凋
亡、肠道细菌内毒素移位和脓毒症及其预后的影响。
方法
共用成年雄性大鼠只,随机分为对照组、烧伤组和组。后两
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组造成总体表面积度烧伤创面,立即腹腔注射地塞米松
从伤后开始分别皮下注射等渗盐水和·,。分四部分进
行观察研究。
对烧伤大鼠肠粘膜屏障的保护作用连续给予,分别于
伤后,利用病理组织学、透射电镜和流式细胞术等方法,观察末端回肠
粘膜组织形态、肠粘膜上皮细胞及细胞连接超微结构、肠粘膜
细胞增殖指数与凋亡率变化。
对烧伤大鼠肠粘膜细胞凋亡的作用伤后一次性给予
分别于伤后,利用病理组织学、末端脱氧核昔酸转移酶介导的
缺口末端标记法法和免疫组织化学等方法,观察末端回肠粘膜组织
形态、肠粘膜细胞凋亡发生率与分布及其凋亡相关蛋白和
表达变化。
对烧伤大鼠肠道细菌内毒素移位的影响伤后一次性给予
,分别于伤后,利用细菌学、基质偶氮显色赏试验定量测定法、放
射免疫法和生物化学等方法,观察肠道细菌向肠系膜淋巴结、肝、肾移
位的频率及组织细菌含量,门静脉与腔静脉血清内毒素含量,腔静脉血清
含量和肝功能变化。
对烧伤大鼠肠源性脓毒症及其预后的影响连续给予
分别于伤后,利用病理学、细菌学、生物化学和诊断学等方法,观察
肝、脾、肾、肺、和门静脉、腔静脉血液等组织脏器脓肿发生率、细菌检
出率,肝、脾、’肾、肺、肠等器官病理与功能改变,以及体重变化和存活率等。
结果
对烧伤大鼠肠粘膜屏障的保护作用①小肠粘膜组织形态学变化
伤后,烧伤组肠粘膜萎缩,部分绒毛脱落,上皮细胞变性、坏死、脱落,固
有层裸露、水肿,炎细胞浸润。组肠粘膜形态结构完整,有轻度萎缩,绒毛
顶部出现上皮下水肿间隙。伤后,烧伤组肠粘膜损伤虽较时有所恢复但
仍重于对照组。组肠粘膜略增厚,绒毛顶部固有层仍水肿。②肠粘膜上皮细
胞超微结构变化伤后烧伤组肠粘膜上皮细胞连接扩张,桥粒结构张力微
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丝稀疏整个上皮细胞群均呈低电子密度,与核异染色质块状聚集造成的高密度
形成较高反差,核固缩,核周池扩张,核孔扩大,异染色质块状、边集有些线
粒体空化、蜡断裂或缺失。组肠上皮细胞及细胞连接基本正常。伤后
烧伤组肠上皮细胞损伤有所恢复,但细胞连接结构局部仍有异常,某些连接处出
现空