文档介绍：酶联免疫吸附测定 （Enzyme-Linked Immunosorbent Assay, ELISA ）
抗原-抗体反应的特点与影响因素
反应条件： 自身因素:
环境因素:
适宜温度
电解质
酸碱度
特点：
特异性
可逆性
最适比例
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凝集反应(agglutination):颗粒性抗原与抗体的反应。
沉淀反应(precipitation):可溶性抗原与抗体的反应。
补体参与的反应
免疫标记技术（immunolabelling technique）:用示踪物质标记抗原或抗体，进行抗原-抗体反应的检测。
抗原-抗体反应的基本检测方法
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用示踪物质标记抗体或抗原，使其与相应的抗原或抗体反应，使微量的、不可见的反应成为可见的或可测定的。
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用FITC-抗IgM单抗计数B细胞
免
疫
荧
光
技
术
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课程内容
ELISA的原理
ELISA的分类
间接ELISA的具体操作
ELISA在医学中的应用实例
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ELISA的原理
E
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间接ELISA
实验目的：小鼠IgG免疫兔，检测兔血清中抗小鼠IgG抗体的效价
实验材料：包被抗原：小鼠血清
待检抗体/一抗：兔抗小鼠IgG
酶标抗体/二抗：HRP-驴抗兔IgG
聚苯乙烯酶标板 水浴箱
移液器 枪头
包被液：
封闭液/ 封：5%脱脂奶粉(ALB)
稀释液/稀：
（磷酸盐缓冲液）
洗液：PBST（PBS+%吐温20）
显色液：四甲替联苯***(TMB)
终止液/终：2M硫酸
阳性反应的最大稀释度为待测样品的效价。
鼠IgG(抗原)
兔抗小鼠IgG(一抗)
HRP-驴抗兔IgG(二抗)
免疫兔
免疫驴
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