文档介绍：毕业设计实验
提取条件探讨及高效液相色谱法分离与测定技术研究
一、实验目的
1、掌握柴胡中柴胡皂昔a提取条件探讨的方法。
2、熟悉了解高效液相色谱法分离与测定柴胡中柴胡皂昔a的操作。
、
三、实验原理（略）实验材料与仪器
试剂：乙腊（色谱纯），甲醇（色谱纯），重蒸馅水，柴胡皂昔a对照品（纯度&gt;98%）,柴胡粗粉（样品），70%乙醇，l%Na2CO3
仪器：高效液相色谱仪，二极管阵列检测器，，785A紫外可见光光度计，AS2060超声清洗器，微孔溶剂过滤器。
四、实验步骤
（一）柴胡中柴胡皂昔a提取条件探讨
1、色谱条件色谱柱,Diamond C18 柱（5 u m,）
流动相：乙腊：水：甲醇=40： 45:15,流速lml/min,检测波长210nm。
2、标准曲线准确称取柴胡皂昔a标准品约5mgo分别置于
10ml容量瓶中，用甲醇溶解后稀释至刻度。混匀后分别进样2 ul、5S、 10"、15S、20",按上述色谱条件作HPLC分析。以对照品含量对峰面
积积分值作图，得一条直线。得回归方程，看线性关系。
3、提取溶剂的考察
称取柴胡粗粉3份（每份20g）,分别以水、70%乙醇（1% Na2CO3）回流提取2次，,滤过，合并滤液。取上述滤液各10ml, 60—70°C 水浴挥干溶剂，残渣加甲醇溶解并定容至5ml。 U m滤膜，作供试品溶液，测定柴胡皂昔a,计算提取率。
4、粉碎与否的考察
称取柴胡饮片和粗粉各20g,加入70%乙醇（l%Na2CO3）回流提取2 次，,滤过，合并滤液。取滤液各10ml, 60—70°C水浴挥干溶剂，残渣加甲醇溶解并定容到5ml。 U m滤膜，作供试品溶液，测定柴胡皂昔a,计算提取率。
5、提取时间的考察
称取柴胡粗粉4份（每份20g）,加70%乙醇（l%Na2CO3）分别提取 2小时、3小时、4小时、6小时。滤过，合并滤液。取上述滤液各10ml, 60—70°C水浴挥干溶剂，残渣加甲醇溶解并定容到5ml。 u m滤膜，作供试品溶液，测定柴胡皂昔a,计算提取率。
（二）高效液相色谱法分离与测定柴胡中柴胡皂昔a
1、色谱条件：Supelco-C18（5 u m,）,流速 ,流动相：V （CH3CN） :V（H20）=90:10,检测波长：208nm,进样量：10"。
2、称取柴胡皂昔a标准品5mg,用乙腊溶解，定容至10ml,冷藏保
存，使用时稀释成适当浓度， U m微孔滤膜过滤。
,用含5%毗嚏的甲醇溶液浸渍24h,然后在 50°C、功率为2000kw条件下超声波处理20min,对样品进行提取，然后用乙腊定容至5ml,冷藏保存， u m微孔滤膜过滤。
按照上述色谱条件，分