文档介绍：第二章 单加氧酶的分子进化及其酶学性质研究
技术路线：
以重组质粒为模板，易错PCR扩增目的基因-----PCR产物双酶切-----与经同样双酶切的载体连接-----连接子转化Bl21感受态细胞------筛选突变子(诱导表达/测定靛第二章 单加氧酶的分子进化及其酶学性质研究
技术路线：
以重组质粒为模板，易错PCR扩增目的基因-----PCR产物双酶切-----与经同样双酶切的载体连接-----连接子转化Bl21感受态细胞------筛选突变子(诱导表达/测定靛蓝含量)，酶切验证(有很好结果的前体下)并测序----重组蛋白-----突变酶的酶学性质研究(分离纯化/研究km)
实验材料
菌株
Fmo表达大肠杆菌（实验室保存）
培养基及其成分
LB培养基：
胰蛋白胨（OXOID） 10g/L
酵母抽提物（OXOID） 5g/L
NaCl 10g/L
pH
若为固体培养基，则需加入15g/L琼脂
主要试剂
Taq DNA聚合酶
限制性内切酶
T4 DNA连接酶
PCR引物
PCR产物纯化试剂盒割胶纯化试剂盒
6）快速定点突变试剂盒
7）质粒抽提试剂盒
8）琼脂糖
主要仪器及设备
移液枪
平皿
玻璃棒
试管
烧杯
离心机
超净工作台
除菌过滤器
压力蒸汽灭菌锅
分光光度仪
电子天平
PCR仪
凝胶成像仪
培英牌THZ-C恒温振荡器
隔水式恒温培养箱
台式离心机
旋转蒸发器RE-52
pH广泛试纸
水平电泳槽
微波炉
冰箱
实