1 / 9
文档名称:

质粒DNA的提取、酶切及其琼脂糖凝胶电泳实验报告.docx

格式:docx   大小:78KB   页数:9页
下载后只包含 1 个 DOCX 格式的文档,没有任何的图纸或源代码,查看文件列表

如果您已付费下载过本站文档,您可以点这里二次下载

分享

预览

质粒DNA的提取、酶切及其琼脂糖凝胶电泳实验报告.docx

上传人:菲菲 2021/12/20 文件大小:78 KB

下载得到文件列表

质粒DNA的提取、酶切及其琼脂糖凝胶电泳实验报告.docx

文档介绍

文档介绍:质粒DNA的提取、酶切及其琼脂糖凝胶电泳实验报告
质粒DNA的提取、酶切及其琼脂糖凝胶电泳实验报告
质粒DNA的提取、酶切及其琼脂糖凝胶电泳实验报告
实验序号
实验时间

实验名称

质粒

DNA

的提取、酶切及其琼脂糖凝胶电泳是否小组合作 是(√) 否(


一.实验预习
质粒DNA的提取、酶切及其琼脂糖凝胶电泳实验报告
质粒DNA的提取、酶切及其琼脂糖凝胶电泳实验报告
质粒DNA的提取、酶切及其琼脂糖凝胶电泳实验报告
1.实验目的:
质粒DNA的提取、酶切及其琼脂糖凝胶电泳实验报告
质粒DNA的提取、酶切及其琼脂糖凝胶电泳实验报告
质粒DNA的提取、酶切及其琼脂糖凝胶电泳实验报告
1)通过本次实验学习和掌握碱裂解法提取质粒;
2)通过本次实验学习琼脂糖凝胶电泳检测 DNA 的方法和技术;
2.实验原理:
1)质粒 DNA的提取:
1)关于质粒:
质粒是一类存在于几乎所有细菌中染色体之外(细胞质中)呈游离状态的双链、
闭环的 DNA分子。质粒通常携带有染色体上所不存在的能够表达产生抗生素、 耐受重金属等重要性状的基因。 细菌质粒的大小范围从 1kb 至 200kb 以上不等,且拥有自己的复制起始位点, 可不依赖于染色体而进行独立自主复制。 一些小的质粒利用宿主细胞的酶进行复制,而较大的质粒则自身携有复制与编码的有关酶。
2)一般分离质粒 DNA的方法都包括 3 个步骤:
①培养细菌,使质粒 DNA大量扩增;
②收集和裂解细菌;
③分离和纯化质粒 DNA。
分离制备质粒 DNA的方法很多,其中常用的方法有碱裂解法、煮沸法、 SDS 法、羟基磷灰石层析法等。 在实际操作中可以根据宿主菌株类型、 质粒分子大小、碱基组成和结构等特点以及质粒 DNA的用途进行选择。( 3)碱裂解法提取大肠杆菌质粒 DNA的原理:
碱裂解法提取质粒 DNA是根据共价闭合环状质粒 DNA和线性染色体 DNA在拓扑学上的差异来分离质粒 DNA。
在 pH 值介于 ~ 这个狭窄的范围内,线性的 DNA双螺旋结构解开而变性,尽管在这样的条件下, 共价闭环质粒 DNA的氢键会被断裂, 但两条互补链彼此相互盘绕,仍会紧密地结合在一起。当加入 乙酸钾高盐缓冲液恢复 pH 至中性时,共价闭合环状的质粒 DNA的两条互补链仍保持在一起, 因此复性迅速而准确;而线性的染色体 DNA的两条互补链彼此已完全分开, 因复性较缓慢且不准确而相互缠绕形成不溶性网状结构。 而复性的质粒 DNA恢复原来构型, 保持可溶性
状态。通过离心,染色体 DNA与不稳定的大分子 RNA,蛋白质 -SDS复合物等一起
沉淀下来而被除去,最后用酚氯仿可以抽提纯化上清液中的质粒 DNA。
2)质粒 DNA的琼脂糖凝胶电泳:
( 1)关于电泳技术:
电泳常用于分离和纯化那些分子大小、 电荷性状或分个构象有所不同的生物大分子——尤其是蛋白质和核酸。 正因为如此,电泳已成为生物化学和分子生物

最近更新

2025年度社区卫生服务中心医务人员劳动合同 6页

版桩施工战略合作合同 7页

2025年宁神中药方剂安神特效药方精选 24页

2025年度电商产品图文创意设计合同 9页

版厂房租赁合同范本 6页

书法入门课件ppt 25页

2025年度环保技术融资合同模板手册 8页

2025年丙肝防治宝典深度解析 29页

2025年度物联网技术在智慧城市建设中的应用合.. 9页

2025年度游戏版权合作开发及运营管理协议 9页

2025年度海洋保护区租赁合同 8页

2025年度汽车租赁订金及押金合同 7页

2025年度水利工程挖机租赁及施工信息共享合同.. 9页

2025年度智能财务代理记账系统委托合同 9页

主谓宾定状补(简单明了) 32页

2025年度智能城市建设项目全新劳务咨询服务合.. 8页

2025年度智慧交通建设项目工程款结算与交通安.. 8页

2025年度新能源汽车租赁合同登记表范本 9页

2025年度新能源储能合伙人合作协议 9页

2025年度新型建材架子工承包合同书 9页

2025年度文化旅游产业借款投资协议 8页

2025年度文化产业咨询与合作协议 9页

2025年度教育行业劳务承揽服务合同 9页

2025年度教育培训中介佣金返还协议 8页

2025年度房地产项目售后服务合同规范 8页

2025年度应急反恐培训保安劳动合同 7页

2025年度带景观阳台买手房购房合同(阳光户型.. 8页

2025年度工地食堂食品安全监管与承包服务协议.. 8页

2025年度工伤私了协议书字样工伤事故赔偿与员.. 7页

寒假写景作文 10页