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环境微生物的检测
——受试菌初步鉴定报告
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CONTENTS
分离环境
形态及理化特征
16sRNA基因PCR结果及网上比对结果
参考文献
结论与讨论
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分离环境
时间
采集地
分离基物
2015年
手指表面
生科院2019室
受试菌的采集步骤：
在酒精灯火焰旁，半开皿盖，用手指（洗手前）在平板上轻轻按一下，迅速盖上皿盖。
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形态及理化特征
菌落形态
在培养基上呈黄色菌落。菌落圆形，凸起，光滑且有光泽，边缘整齐。
形态特征：菌落特征
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形态及理化特征
显微特征
圆球状，无鞭毛且不可运动
形态特征
鞭毛染色
1、步骤
制片：滴菌液→倾斜玻片→室温干燥
染色：A液3-5min→水洗→B液冲残水，覆盖染色→出现明显褐色时轻轻水洗→晾干
2、结果
受试菌无鞭毛不可运动
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形态及理化特征
革兰氏染色
形态特征
1、步骤
制片：载玻片：火烧去脂→水滴：小→菌：少(薄而均匀)
染色：滴加结晶紫染液初染2min→水洗→冲残水后滴加卢戈氏碘液媒染1min→水洗→吸残水后滴加95%乙醇脱色约30s→滴加沙黄染液复染1-2min→水洗→吸干水，镜检
2、结果
受试菌为革兰氏染色阳性菌
G+（金黄色葡萄球菌）
受试菌
G-（大肠杆菌）
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形态及理化特征
TITLE TITEXT
枯草芽孢杆菌
淀粉水解实验
大肠杆菌
1、步骤：
固体淀粉培养基→划线接种→37℃培养24h→滴加碘液（均匀铺满平板）→观察
2、结果：
受试菌周围未出现无色透明圈
说明不能分泌胞外淀粉酶
受试菌
理化特征
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形态及理化特征
变形杆菌
糖发酵实验
大肠杆菌
1、步骤
葡萄糖发酵半固体培养基（含指示剂溴甲酚紫）→穿刺接种→37℃培养24~48h→观察培养基颜色和是否产生气泡
乳糖发酵半固体培养基（含指示剂溴甲酚紫）→穿刺接种→37℃培养24~48h→观察培养基颜色和是否产生气泡
2、结果
受试菌在培养基中生长，但葡萄糖和乳糖半固体培养基均为紫色，且未裂开，说明受试菌进行葡萄糖和乳糖发酵均不产酸不产气
受试菌
理化特征
变形杆菌
大肠杆菌
受试菌
葡萄糖
乳 糖
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形态及理化特征
氨苄青霉素抗性实验
1、步骤
氨苄青霉素滤纸条→垂直接种→培养→观察、测量滤纸条距菌起始位置的距离
2、结果
受试菌对青霉素敏感
理化特征
受试菌
大肠杆菌
芽孢杆菌
葡萄球菌
平板编号
大肠杆菌
金黄色葡萄球菌
枯草芽孢杆菌
受试菌
1
（？）
2
——
抑菌长度
（cm）
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形态及理化特征
API20NE试剂条检测
a)选择菌落（先确定是否为单一纯菌株）
b)向培养盒中加入少许无菌水（保持湿度）
c)%NaCl(aq)（已灭菌）中，。用同一枪头分别接种盐水菌悬液从NO3到PNPG试剂管（120µL/管）。
d)将剩余的200µL生理盐水菌悬液加至APIAUX培养基，仔细混匀，注满由GLU至PAC管（250µL/管）。
e)GLU,ADH,URE三个管用矿物油覆盖
f)将API 20E STRIP放入盒中，盖上盒盖，在30℃培养24h。
理化特征
a)培养后，将一滴NIT 1和NIT 2试剂进入到NO3中，5min后，红色表示阳性反应；阴性反应的，为排除N2的影响，加入锌粉5min，无色表示阳性反应。
b)将JAMES试剂加入TRP，立即显现粉红色为阳性反应
c)其他见实验结果判定表
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