文档介绍：鸡蛋卵黄高磷蛋白磷酸肽(PPP)酶联免疫分析
试剂盒使用说明书
本试剂盒仅供研究使用。
检测范围：96T
20pg/ml-500pg/ml
使用目的：
本试剂盒用于测定血清、血浆及相关液体样本中鸡蛋卵黄高磷蛋白磷酸肽(PPP)含量。
实验原理
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中鸡蛋卵黄高磷蛋白磷酸肽 (PPP)水平。用纯化的
鸡蛋卵黄高磷蛋白磷酸肽(PPP)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次
加入鸡蛋卵黄高磷蛋白磷酸肽(PPP)，再与 HRP 标记的鸡蛋卵黄高磷蛋白磷酸肽(PPP)抗体
结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物 TMB 显色。TMB 在 HRP
酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的鸡蛋卵
黄高磷蛋白磷酸肽(PPP)呈正相关。用酶标仪在 450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标
准曲线计算样品中鸡蛋卵黄高磷蛋白磷酸肽(PPP)浓度。
试剂盒组成
1
30倍浓缩洗涤液
20ml×1瓶
6ml×1瓶
12孔×8条
6ml×1瓶
6ml×1瓶
6ml×1/瓶
7
8
9
终止液
6ml×1瓶
2 酶标试剂
标准品（960pg/ml） ×1瓶
3 酶标包被板
4 样品稀释液
5 显色剂 A液
6 显色剂 B液
标准品稀释液
×1瓶
1份
10 说明书
11 封板膜
12 密封袋
2张
1个
标本要求
1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能
马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融
2．不能检测含NaN3的样品，因 NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。
操作步骤
1. 标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀
释。
480pg/ml
240pg/ml
120pg/ml
60pg/ml
30pg/ml
5号标准品
4号标准品
3号标准品
2号标准品
1号标准品
150µl的原倍标准品加入 150µl标准品稀释液
150µl的 5号标准品加入 150µl标准品稀释液
150µl的 4号标准品加入 150µl标准品稀释液
150µl的 3号标准品加入 150µl标准品稀释液
150µl的 2号标准品加入 150µl标准品稀释液
2. 加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、
待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样 50µl，待测样品孔中先加样品稀释液 40µl，
然后再加待测样品 10µl（样品最终稀释度为 5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽
量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
3.
4.
5.
温育：用封板膜封板后置 37℃温育30分钟。
配液：将 30倍浓缩洗涤液用蒸馏水 30倍稀释后备用
洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置 30秒后弃去，如此
重复 5次，拍干。
6.
7.
8.
9.
加酶：每孔加入酶标试剂 50µl，空白孔除外。
温育：操作同