文档介绍：色谱分析在海洋真菌活性成分筛选中的应用
答辩人:
专业:环境科学 071
导师:
论文框架
研究背景
研究课题
论文要点
结论
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研究背景
色谱技术是分析化学领域最重要的分离分析手段。随着色谱研究工作的迅猛发展,各种新的色谱方法和检测技术日趋成熟,色谱联用技术因其具有高速、高效、高分辨、微量检测及分析自动化的性能和技术优势,而显示出广阔的应用前景。
在线光谱分析
HPLC/UV
HPLC/MS
HPLC/NMR
常规光谱分析
UV
MS
NMR
真菌代谢产物是非常复杂的混合物,其所含化合物可达数百种之多。对其中每一个成分进行分离、纯化及结构鉴定是一项既耗钱又耗力的工作。液相色谱/光谱(紫外、质谱及核磁共振)联用新技术主要就是针对这种情形,为了节约时间、经费和无谓的重复性劳动而出现的。
研究课题
研究内容本论文实验主要是针对一株海洋真菌的培养条件进行优化,然后进行初步的柱色谱分离与纯化,配以TLC､HPLC/UV检测,渴望得到含有目标化合物的真菌培养条件。
课题意义海洋微生物代谢产物多样且具有药物活性、且微生物培养方便。利用这些丰富的海洋天然产物可用来生产高活性的海洋药物。本次研究为后续的专性研究提供有利的基础保障。
论文要点
试验方法
菌株的培养条件优化
真菌代谢产物的化学筛选
结果与分析
结论
菌株培养条件优化
培养基配制:
PDB培养基:葡萄糖20g/L,酵母粉3g/L,蛋白胨5g/L,味精5g/L,,50%陈海水煮土豆(200g/L),蒸馏水定容至1L。
H1培养基:山梨醇20g/L,麦芽糖20g/L,味精10g/L,,酵母粉3g/L,,MgSO4•7H2O ,50%陈海水配制,,蒸馏水定容至1L。
寡营养培养基(GMPY):,蛋白胨5g/L,酵母粉3g/L,甘露醇20 g/L,自来水配制,,蒸馏水定容至1L。
大米培养基(RICE):大米100 g/L,,海水130 ml
培养方法:
液体培养基选用摇床动态培养,固体培养基选用静态培养,于生化培养箱中28℃光照条件下分别静置培养
摇床培养在4、6、8、10、12、14天灭菌;固体静态培养在7、10、14、17、21、25、30天灭菌。
菌株培养条件优化
真菌代谢产物的分离提纯
真菌代谢产物的分离纯化通过柱层析色谱的梯度洗脱来实现
化学检测
TLC检测
HPLC/UV检测
仪器为Dionex HPLC仪(P680 HPLC 蠕动泵,UVD 340U紫外可见发光二极管阵列检测器,C18柱(5μm,×250mm))