文档介绍：杀菌率试验规程【精选文档】
杀菌率试验规程【精选文档】
杀菌率试验规程【精选文档】
Q/KM — ZJ— — 2008
液体洗涤剂杀菌试验规)制成菌片。每个菌片回收菌落,按活菌培养计数所得结果，应为 5× 105— 5× 106 cfu/片。）
⑷细菌繁殖体悬液和菌片，用毕应随时保存在 4℃冰箱内。尽量减少在室温下放置时间,以减少细菌的自然死亡.（应当天使用不得过夜. ）
3、操作程序
、悬液定量法杀菌试验操作程序
⑴、样品用无菌标准硬水稀释至同中和剂鉴定用试液浓度,或低于中和剂鉴定用试液浓度，制成（稀释液）试验样液.
⑵、将试管按需要数量分别排列于试管架上,各组由左向右,排序、标记.
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⑶、配制菌悬液，浓度为 1× 10 ～9×10
cfu/ml - GB15979—2002《一次性使用卫生用品卫生标准》或 1
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×10 —5×10 cfu/ml — 2002 《消毒技术规范》
⑷、取杀菌试验用无菌大试管，先加入 0。5ml 试验用菌悬液，再加入 0。5ml 有机干扰物质，混匀，置 20±1℃ 5min ，用无菌吸管吸取步骤 1 中的试验样液 4。0ml 注入其中, 立即开启计时器, 并迅速混匀 (在手掌上振摇 80 次）。- 见《消毒技术规范》或吸取试验用菌悬液 0。1ml ，加入到含 5ml 样液的试管中，立即开启计时器，并迅速混匀(在手掌上振摇 80 次）。 - 见 QB/T 2738—2005
⑸、作用 2min、5min、10min、20min,即刻用无菌吸管吸取 0。5ml 移入鉴定合格的 4。5ml 中和剂溶液中(中和剂的浓度与容量应与鉴定试验结果规定的相同）充分混匀，中和作用 10min 后,取样液、 10 倍系列稀释液 0。5ml (见 GB15979-2002）或分别吸取 1。0 ml (— 见《消毒技术规范》 )（见图四），置于 2 个灭菌平皿，用凉至 40～45℃营养琼脂培养基或沙氏琼脂培养基（酵母菌） 15ml 作倾注，转动平皿, 使其充分均匀,琼脂凝固后翻转平板， 35℃± 2℃培养 48h（细菌)或（酵母菌） 25℃± 2℃培养 72h，作活菌菌落计数。
⑹、同时用稀释液代替样液进行平行试验，作为阳性对照管。
⑺、阴性对照组：分别吸取试验用相关溶液和培养基进行培养，观察有无污染。
⑻、计数菌落时,一般以肉眼观察，必要时用放大镜检查。以菌落数在 15cfu ～300cfu 的平板为准，每个稀释度 3 个平板生长菌落数全部合乎上述标准，则以该 3 个平板的菌落平均值作为结果；若有 2 个符合合乎上述标准,则以该合格的 2 个平板菌落的平均值作为结果。
⑼、试验重复 3 次，（ cfu/ml ），计算杀菌率，见计算公式 1。或根据各组活菌浓度换算为对数值（ N），计算杀灭对数值，见计算公式 2。
载体法杀菌试验操作程序
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⑴、试验样品用无菌标准硬水（过滤除菌）稀释至规定浓度,制成(稀释液）试验样液.
⑵、吸取样液放入灭菌平皿，另吸取 PBS 5。0ml 注入平皿中，作为阳性对照皿。每皿用无菌镊子夹住菌片一角放入试样皿和阳性对照皿。
⑶、作用至设定时间后，即刻用无菌镊子夹住菌片一角，投入含中和剂的试管中（中和剂的浓度与容量应与鉴定试验结果规定的相同）充分混匀计时。（见图三 )
⑷、中和 10min 后，取样液或 10 倍系列稀释液（（见图四)，置于两个灭菌平皿，接种凉至 40～ 45℃营养琼脂培养基或沙氏琼脂培养基(酵母菌) 15ml，转动平皿 10—20 下，使其充分均匀，凝固后，于 35℃± 2℃培养 48h(细菌)或 72h(酵母菌),作活菌菌落计数.
⑸、试验重复 3 次，求其平均值。
⑹、阴性对照组:分别吸取试验用相关溶液和培养基进行培养，观察有无污染。
A、 PBC液（ 0。03mol/L 磷酸盐缓冲液）、
B、无菌标准硬水 1ml 置于灭菌平皿内、
C、空白平皿，倾注营养琼脂培养基（细菌）或沙氏琼脂培养基(酵母菌） 15ml 培养.
⑺、计数菌落时，一般以肉眼观察，必要时用放大